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本研究从黑白花种公牛、水牛、山羊粪样及山羊瘤胃内容物中分离到12株厌氧真菌,并对其进行了产高活性羧甲基纤维素酶和木聚糖酶菌株的筛选,同时还就培养基主要组分对厌氧真菌产酶的影响和厌氧真菌的粗酶性质进行了研究。整个实验分三部分进行。 第一部分从黑白花种公牛、水牛、山羊粪样及山羊瘤胃内容物中分离到12株厌氧真菌,并对其进行了产高活性羧甲基纤维素酶和木聚糖酶菌株的筛选,结果表明,分离自黑白花种公牛,粪样编号为A4的厌氧真菌所产生的木聚糖酶和羧甲基纤维酶活最高,分别达13.54U·mL-1和0.25U·mL-1,所对应的稻草表观干物质消失率为46.56%。 第二部分对培养基底物及主要组分无细胞瘤胃液和酵母膏对厌氧真菌A4菌产酶的影响进行了研究。结果表明,当以等量稻草秸、玉米秸、花生秸、滤纸(颗粒直径为5mm)为发酵底物时,A4菌在0~96h培养期间,产生的最大木聚糖酶活分别为14.31U·mL-1、11.39U·mL-1、6.99U·mL-1、13.38U·mL-1,最大羧甲基纤维素酶活分别为0.25U·mL-1、0.15U·mL-1、0.13U·mL-1、0.27U·mL-1。与基础产酶培养基相比,降低培养基中无细胞瘤胃液浓度对厌氧真菌所产木聚糖酶的酶活及比活力无显著影响(P>0.05),但对其所产的羧甲基纤维素酶的酶活及比活力有显著影响(P<0.05)。较高浓度的酵母膏能促进厌氧真菌木聚糖酶和羧甲基纤维素酶的产生。 第三部分就厌氧真菌粗酶的性质进行了初步研究。结果表明,在20℃条件下,提取厌氧真菌粗酶所用的硫酸铵最佳盐析饱和度为70%。盐析后,45℃烘干得到粗酶粉,该粗酶粉的木聚糖酶和羧甲基纤维素酶比活力分别为7562U·g-protein-1和37.6U·g-protein-1。对粗酶性质的初步研究表明,木聚糖酶酶促反应最适温度为50℃、最适pH在5.0~6.0之间,在37℃~50℃之间、pH值为4.0~11.0范围内较稳定;羧甲基纤维素酶酶促反应最适作用温度为50℃、最适作用pH为6.0,在37℃~50℃之间、pH值为5.0~11.0范围内较稳定。