人神经母细胞瘤NB-1的细胞膜离子通道的实验研究

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目的:研究人员希望掌握NB-1细胞的培养和体外诱导分化方法;应用酶组织化学技术研究细胞中与离子代谢和转运密切相关的Na-K-ATP酶和Ca-ATP酶的分布情况;应用全细胞膜片钳技术阐明细胞膜是否存在电压依赖性离子通道,如果存在,其电压依赖性钠,钾和钙通道的类型,动力学和药理学特性如何,以形成对NB-1细胞的全认识.由于NB-1细胞来源于人体,上述研究将有可能为人类颅脑损伤的离子通道研究提供一个细胞模型,对颅脑损伤的发病机理和治疗的研究具有现实意义.结论:1、体外培养的NB-1细胞生长稳定,在db-cAMP的作用下,向成熟细胞分化,形态学和酶组织化学研究显示其具备在体神经元的特性.2、分化成熟的NB-1细胞可以产生动作电位,全细胞膜片钳研究证实含有电压依赖性TTX敏感性钠通道和延迟整流钾通道.3、分化成熟的NB-1细胞含有T,L,N轱型电压依赖性钙通道.4、db-cAMP的处理可以使细胞静息电位增大,产生超射型的动作电位.可以使钠电流和钾电流增大.可以使T型钙电流出现,L和N型钙电流增大.5NB-1细胞的电压依赖性钠,钾和钙通道具有与在体神经元电压依赖性离子通道相似的动力学,药理学和通透特性,鉴于其可以在体外稳定传代,易于维护,实验的重复性好,易于施加外界影响及来源于人体的特点,NB-1细胞可以作为人类颅脑损伤和神经元离子通道研究的良好细胞模型.
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