中国人膀胱癌BIU-87细胞系特异性导向肽的体外鉴定

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目的:课题组前期利用中国人膀胱癌细胞系BIU-87筛选出了中国人小分子多肽CSSPIGRHC,该实验要鉴定此多肽对中国人膀胱癌细胞系BIU-87的结合是否具有特异性以及结合力的强弱。方法:培养4种癌细胞:中国人膀胱癌细胞系BIU-87、人肝癌细胞系SMMC-7721、人乳腺癌系MCF-7、人宫颈癌细胞系Si Ha,分别结合荧光小分子多肽(荧光探针)FITC-CSSPIGRHC,在激光共聚焦显微镜下观察和流式细胞仪中检测。结果:1.本实验成功培养了中国人膀胱癌细胞系BIU-87、人肝癌细胞系SMMC-7721、人乳腺癌系MCF-7、人宫颈癌细胞系Si Ha,各个细胞系生长良好,达到了实验要求。2.激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察显示:2.1荧光探针FITC-CSSPIGRHC能与中国人膀胱癌BIU-87细胞、人肝癌SMMC-7721细胞、人乳腺癌MCF-7细胞和人子宫颈癌Si Ha细胞结合(呈绿色)。2.2荧光探针FITC-CSSPIGRHC与中国人膀胱癌BIU-87细胞结合的平均荧光值强于人肝癌SMMC-7721细胞、人乳腺癌MCF-7细胞和人子宫颈癌Si Ha细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。3.流式细胞仪(FCM)检测显示:3.1荧光探针FITC-CSSPIGRHC能与中国人膀胱癌BIU-87细胞、人肝癌SMMC-7721细胞、人乳腺癌MCF-7细胞和人子宫颈癌Si Ha细胞结合(平均荧光强度值高于空白组)。3.2荧光探针FITC-CSSPIGRHC与中国人膀胱癌BIU-87细胞结合的平均荧光强度值高于人肝癌SMMC-7721细胞、人乳腺癌MCF-7细胞和人子宫颈癌Si Ha细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。4.统计分析结果显示:导向肽CSSPIGRHC既能和中国人膀胱癌细胞系BIU-87能够结合,且很强,也能和其它3种癌细胞结合,但是前者明显比后3种结合力强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:中国人小分子多肽CSSPIGRHC能与中国人膀胱癌BIU-87细胞特异性结合,它有可能作为中国人膀胱癌BIU-87细胞特异性导向肽。
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