目的:选用三氟乙醚和青霉素制作二次打击惊厥模型(two-hit seizure model),观察惊厥大鼠的行为变化特点,并记录惊厥阈及存活率。方法:取日龄8天(Postnatal days 8,P8)的Sprague-Dawley(SD)大鼠共120只,依据随机数字表法随机分为对照组和惊厥组,每组各60只。适应性喂养1天后,于P9天,惊厥组大鼠反复吸入三氟乙醚诱导惊厥发作,每日5次,每次间隔30分钟,同样方法连续诱导13天;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚。于P63天,分别对两组大鼠腹腔注射青霉素(5.1×106U/kg/d)直至惊厥发作,连续观察1小时,记录自腹腔注射后首次出现惊厥发作的时间,即惊厥潜伏期(即惊厥阈),观察惊厥大鼠行为变化特点,并计算大鼠的存活率。结果:利用三氟乙醚和青霉素成功建立了二次打击惊厥模型,结果显示:腹腔注射青霉素后,与对照组(31.46±7.13 min)相比,三氟乙醚致惊厥组大鼠的惊厥潜伏期(13.67±5.65 min)明显缩短(P<0.01),即惊厥阈值明显降低;并且惊厥组大鼠的存活率(55%)远低于对照组(存活率为75%)。结论:1.继三氟乙醚诱导新生期反复惊厥模型,于P63天采用青霉素诱导第二次惊厥发作,成功建立二次打击惊厥模型。2.P63天腹腔注射青霉素后,可使三氟乙醚致惊厥组大鼠的惊厥阈明显降低,且表现出较低的存活率。目的:探讨生酮饮食长程干预对新生期惊厥性脑损伤远期神经行为和苔藓纤维发芽的影响及机制。方法:生后8天(P8)的SD大鼠共60只,依据随机数字表法随机分为单纯对照组(NS+ND组)、对照加生酮饮食组(NS+KD组)、单纯惊厥组(RS+ND组)、惊厥加生酮饮食组(RS+KD组),每组各15只。适应性喂养1天后,于P9天,RS+ND组和RS+KD组大鼠反复吸入三氟乙醚诱导惊厥发作,每日5次,每次间隔30分钟,同样方法连续诱导13天;对NS+ND组和NS+KD组同样操作但不吸入三氟乙醚。于P23天开始,NS+KD组和RS+KD组大鼠给予生酮饮食(KD),NS+ND组和RS+ND组大鼠给予普通饮食(ND),饮食干预30天。于P33、P43、P53分别进行神经反射实验。于P54~P60行Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力。于P61、P62行旷场实验检测大鼠的认知情绪功能。于P63,对各组大鼠腹腔注射青霉素后,观察大鼠行为变化并记录惊厥阈及存活率,同时测血酮值和血糖值。随后,每组随机取5只,共20只,断头取脑,采用Timm染色法观察海马苔藓纤维异常发芽程度。每组随机取5只,共20只,断头取海马大脑皮质,采用免疫印迹技术(Western blot)检测各组大鼠海马及大脑皮质ZIP7、Apo A1、c PLA2、P53、P62蛋白的表达。结果:1.对体重的影响:生酮饮食干预期间(P23-P53),四组大鼠的体重变化有总体性差异(P<0.01),两两比较结果显示:于P23-P53,RS+ND组和RS+KD组大鼠各时间点体重较NS+ND组均显著降低(P<0.01);于P26-P53,NS+KD组大鼠各时间点体重较NS+ND组显著降低(P<0.01);于P29-P53,RS+KD组大鼠各时间点体重较RS+ND组显著降低(P<0.01)。2.神经反射实验:⑴平面翻正时间:P33天四组大鼠平面翻正时间无显著性差异[F(3,16)=0.51,P=0.682>0.05];P43天四组大鼠平面翻正时间有显著性差异,且差异有统计学意义[F(3,16)=19.95,P<0.0001],进一步两两比较,RS+ND组的平面翻正时间较NS+ND组明显缩短(P<0.05),其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05);P53天四组大鼠平面翻正时间有显著性差异,且差异有统计学意义[F(3,16)=7.23,P=0.003<0.01],进一步两两比较,惊厥组大鼠经生酮饮食长程干预后即RS+KD组的平面翻正时间较RS+ND组明显延长(P<0.05),其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。⑵前肢悬吊时间:P33天四组大鼠前肢悬吊时间存在显著性差异,差异有统计学意义[F(3,16)=6.3,P=0.005<0.01]。进一步两两比较,RS+ND组的前肢悬吊时间较NS+ND组明显缩短(P<0.05),其余各组差异无统计学意义(P>0.05)。P43天四组大鼠前肢悬吊时间无显著性差异[F(3,16)=0.34,P=0.797>0.05]。P53天四组大鼠前肢悬吊时间无显著性差异[F(3,16)=1.5,P=0.252>0.05]。⑶负向趋地反应时间:P33天四组大鼠负向趋地反应时间存在显著性差异,差异有统计学意义[F(3,16)=10.68,P=0.0004<0.01]。进一步两两比较,RS+ND组和RS+KD组的负向趋地反应时间较NS+ND组均明显延长(P<0.05),其余各组差异无统计学意义(P>0.05)。P43天四组大鼠负向趋地反应时间存在显著性差异,差异有统计学意义[F(3,16)=52.06,P<0.0001],进一步两两比较,RS+ND组、RS+KD组和NS+KD组的负向趋地反应时间较NS+ND组均明显延长(P<0.05),而惊厥组大鼠经生酮饮食长程干预后即RS+KD组的负向趋地反应时间较RS+ND组明显缩短(P<0.05)。P53天四组大鼠负向趋地反应时间存在显著性差异,差异有统计学意义[F(3,16)=13.98,P<0.0001],进一步两两比较,RS+ND组的负向趋地反应时间较NS+ND组明显延长(P<0.05),而惊厥组大鼠经生酮饮食长程干预后即RS+KD组的负向趋地反应时间较RS+ND组明显缩短(P<0.05),RS+KD组与NS+ND组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常。⑷悬崖回避时间:P33天四组大鼠悬崖回避时间存在显著性差异,差异有统计学意义[F(3,16)=28.09,P<0.0001]。进一步两两比较,RS+ND组的悬崖回避时间较NS+ND组明显延长(P<0.05);而惊厥组大鼠经生酮饮食长程干预后即RS+KD组的悬崖回避时间较RS+ND组明显缩短(P<0.05),RS+KD组与NS+ND组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常。P43天四组大鼠悬崖回避时间存在显著性差异,差异有统计学意义[F(3,16)=43.68,P<0.0001],进一步两两比较,RS+ND组的悬崖回避时间较NS+ND组明显延长(P<0.05);而惊厥组大鼠经生酮饮食长程干预后即RS+KD组的悬崖回避时间较RS+ND组明显缩短(P<0.05),RS+KD组与NS+ND组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常。P53天四组大鼠悬崖回避时间存在显著性差异,差异有统计学意义(F(3,16)=31.07,P<0.0001),进一步两两比较,RS+ND组和NS+KD组的悬崖回避时间较NS+ND组明显延长(P<0.05),而惊厥组大鼠经生酮饮食长程干预后即RS+KD组的悬崖回避时间较RS+ND组明显缩短(P<0.05),RS+KD组与NS+ND组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常。3.Morris水迷宫:⑴定位航行实验:四组大鼠水迷宫逃避潜伏期存在组间显著性差异[F(3,12)=156.6,P<0.0001],训练天数显著性差异[F(4,16)=63.33,P<0.0001]以及组间因素与训练天数的交互作用的显著性差异[F(12,48)=4.650,P<0.0001],差异具有统计学意义(P<0.01)。两两比较发现:实验第1天至第5天,RS+ND组逃避潜伏期较NS+ND组均明显延长(P<0.05)。实验第2天至第5天,惊厥组大鼠经生酮饮食长程干预后即RS+KD组逃避潜伏期较RS+ND组均明显缩短(P<0.05),RS+KD组与NS+ND组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常。此外,NS+KD组逃避潜伏期较NS+ND组均明显延长(P<0.05)。⑵空间探索实验:四组大鼠穿越平台次数比较存在显著性差异[F(3,16)=12.41,P=0.0002],差异具有统计学意义(P<0.01)。两两比较发现,RS+ND组和NS+KD组大鼠穿越平台次数较NS+ND组均明显减少(P<0.05),而惊厥组大鼠经生酮饮食长程干预后即RS+KD组较RS+ND组明显增多(P<0.05),RS+KD组与NS+ND组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常。4.旷场实验:⑴延迟时间:四组大鼠旷场实验延迟时间存在组间显著性差异[F(3,12)=101.7,P<0.0001],及组间因素与训练天数的交互作用的显著性差异[F(3,12)=7.116,P=0.0053],差异具有统计学意义(P<0.01),而训练天数间无显著性差异[F(1,4)=5.213,P=0.0845]。两两比较发现:与NS+ND组相比,RS+ND组和NS+KD组的延迟时间(P61、P62)均明显延长(P<0.05);与RS+ND组相比,惊厥组大鼠经生酮饮食长程干预后即RS+KD组大鼠的延迟时间(P61、P62)明显缩短(P<0.05),RS+KD组与NS+ND组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常。⑵开场得分:四组大鼠旷场实验开场得分存在组间显著性差异[F(3,12)=35.72,P<0.0001],及训练天数显著性差异[F(1,4)=74.17,P=0.001],差异具有统计学意义(P<0.01),而组间因素与训练天数的交互作用无显著性差异[F(3,12)=3.41,P=0.0531]。两两比较发现:与NS+ND组相比,RS+ND组和NS+KD组的开场得分(P61、P62)均明显降低(P<0.05);与RS+ND组相比,惊厥组大鼠经生酮饮食长程干预后即RS+KD组大鼠的开场得分(P61、P62)明显升高(P<0.05),RS+KD组与NS+ND组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常。5.Timm染色结果显示:RS+ND组CA3区始层和齿状回内分子层苔藓纤维发芽程度较NS+ND组显著升高(P<0.01),而惊厥组大鼠经生酮饮食长程干预后即RS+KD组CA3区始层和齿状回内分子层苔藓纤维发芽程度较RS+ND组明显降低(P<0.05),RS+KD组与NS+ND组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常。6.惊厥阈及存活率结果显示:⑴惊厥阈:与NS+ND组相比,RS+ND组和RS+KD组大鼠的惊厥阈明显降低(P<0.05),而与RS+ND组相比,惊厥组大鼠经生酮饮食长程干预后即RS+KD组大鼠的惊厥阈明显升高(P<0.05),其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。⑵存活率:NS+ND组(73.3%)、NS+KD组(60%)、RS+ND组(46.7%)、RS+KD组(73.3%)。7.Western blot显示:⑴海马:与NS+ND组相比,RS+ND组ZIP7、Apo A1、P53、P62在海马中的表达均明显升高(P<0.05),c PLA2在海马中的表达明显降低(P<0.05);RS+KD组P53在海马中的表达明显降低(P<0.05)。而与RS+ND组相比,惊厥组大鼠经生酮饮食长程干预后即RS+KD组ZIP7、Apo A1、P53、P62在海马中的表达均明显降低(P<0.05),c PLA2在海马中的表达明显升高(P<0.05);对于ZIP7、Apo A1、P62、c PLA2在海马中的表达,RS+KD组与NS+ND组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常。其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。⑵大脑皮质:与NS+ND组相比,RS+ND组ZIP7、Apo A1、P53、P62在大脑皮质中的表达均明显升高(P<0.05),c PLA2在大脑皮质中的表达明显降低(P<0.05);而与RS+ND组相比,惊厥组大鼠经生酮饮食长程干预后即RS+KD组ZIP7、Apo A1、P53、P62在大脑皮质中的表达均明显降低(P<0.05),c PLA2在大脑皮质中的表达明显升高(P<0.05),其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.生酮饮食长程干预对新生期惊厥性脑损伤远期神经行为、认知、苔藓纤维发芽、惊厥阈、存活率等有干预作用,即生酮饮食长程干预可减轻远期神经行为、认知的损伤、抑制海马苔藓纤维异常发芽,提高惊厥阈和存活率。2.生酮饮食长程干预,能显著下调新生期惊厥导致的ZIP7、Apo A1、P53、P62在海马及大脑皮质表达的升高,上调c PLA2表达的降低。3.本研究采用二次打击惊厥模型初步表明,生酮饮食长程干预可能通过锌-脂质过氧化-自噬信号通路发挥对新生期惊厥性脑损伤的神经保护作用。目的:探讨褪黑素长程干预对新生期惊厥性脑损伤远期神经行为和苔藓纤维发芽的影响及机制。方法:生后8天(P8)的SD大鼠共60只,依据随机数字表法随机分为单纯对照组(CONT组)、褪黑素空白对照组(MEL组)、单纯惊厥组(RS组)、惊厥加褪黑素组(RS+MEL组),每组各15只。适应性喂养1天后,于P9天,RS组和RS+MEL组大鼠反复吸入三氟乙醚诱导惊厥发作,每日5次,每次间隔30分钟,同样方法连续诱导13天;对CONT组和MEL组同样操作但不吸入三氟乙醚。自P23始对MEL组和RS+MEL组于每天早上8点以10mg/kg腹腔注射MEL,同时CONT组和RS组以同时同等剂量腹腔注射5%乙醇溶液,连续注射30d。于P33、P43、P53分别进行神经反射实验。于P54~P60行Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆能力。于P61、P62行旷场实验检测大鼠的认知情绪功能。于P63,对各组大鼠腹腔注射青霉素后,观察大鼠行为变化并记录惊厥阈及存活率,随后,每组随机取5只,共20只,断头取脑,采用Timm染色观察海马苔藓纤维异常发芽的程度。每组随机取5只,共20只,断头取海马和大脑皮质,采用免疫印迹技术(Western blot)检测各组大鼠海马及大脑皮质Zn T1、ZIP7、Apo A1、c PLA2、P53、P62、Beclin1、Bcl-2、LC3Ⅱ/Ⅰ、Cathepsin E蛋白的表达。结果:1.神经反射实验:⑴平面翻正时间:P33天四组大鼠平面翻正时间无显著性差异[F(3,16)=2.518,P=0.095>0.05];P43天四组大鼠平面翻正时间有显著性差异,且差异有统计学意义[F(3,16)=8.241,P=0.0015<0.01],进一步两两比较,RS组和RS+MEL组的平面翻正时间较CONT组均明显缩短(P<0.05),其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05);P53天四组大鼠平面翻正时间有显著性差异,且差异有统计学意义[F(3,16)=4.622,P=0.0164<0.05],进一步两两比较,RS组的平面翻正时间较CONT组明显缩短(P<0.05),其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。⑵前肢悬吊时间:P33天四组大鼠前肢悬吊时间存在显著性差异,差异有统计学意义[F(3,16)=9.238,P=0.0009<0.01]。进一步两两比较,RS组的前肢悬吊时间较CONT组明显缩短(P<0.05),其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。P43天四组大鼠前肢悬吊时间有显著性差异,差异有统计学意义[F(3,16)=8.544,P=0.0013<0.01]。进一步两两比较,RS组的前肢悬吊时间较CONT组明显缩短(P<0.05),其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。P53天四组大鼠前肢悬吊时间有显著性差异,差异有统计学意义[F(3,16)=7.642,P=0.0022<0.01]。进一步两两比较,RS组的前肢悬吊时间较CONT组明显缩短(P<0.05),而惊厥组大鼠经褪黑素长程干预后即RS+MEL组的前肢悬吊时间较RS组明显延长(P<0.05),RS+MEL组与CONT组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常。⑶负向趋地反应时间:P33天四组大鼠负向趋地反应时间存在显著性差异,差异有统计学意义[F(3,16)=27.07,P<0.0001]。进一步两两比较,与CONT组相比,RS组和RS+MEL组的负向趋地反应时间均明显延长(P<0.05);而与RS组相比,惊厥组大鼠经褪黑素长程干预后即RS+MEL组的负向趋地反应时间均明显缩短(P<0.05);此外,与MEL组相比,RS组和RS+MEL组的负向趋地反应时间均明显延长(P<0.05)。P43天四组大鼠负向趋地反应时间存在显著性差异,差异有统计学意义[F(3,16)=73.44,P<0.0001],进一步两两比较,与CONT组相比,RS组和RS+MEL组的负向趋地反应时间均明显延长(P<0.05);而与RS组相比,惊厥组大鼠经褪黑素长程干预后即RS+MEL组的负向趋地反应时间均明显缩短(P<0.05);此外,与MEL组相比,RS组和RS+MEL组的负向趋地反应时间均明显延长(P<0.05)。P53天四组大鼠负向趋地反应时间存在显著性差异,差异有统计学意义[F(3,16)=154.2,P<0.0001],进一步两两比较,与CONT组相比,RS组和RS+MEL组的负向趋地反应时间均明显延长(P<0.05);而与RS组相比,惊厥组大鼠经褪黑素长程干预后即RS+MEL组的负向趋地反应时间均明显缩短(P<0.05);此外,与MEL组相比,RS组和RS+MEL组的负向趋地反应时间均明显延长(P<0.05)。⑷悬崖回避时间:P33天四组大鼠悬崖回避时间存在显著性差异,差异有统计学意义[F(3,16)=175.8,P<0.0001]。进一步两两比较,与CONT组相比,RS组和RS+MEL组的悬崖回避时间均明显延长(P<0.05);与MEL组相比,RS组和RS+MEL组的悬崖回避时间均明显延长(P<0.05),其余各组差异无统计学意义(P>0.05)。P43天四组大鼠悬崖回避时间存在显著性差异,差异有统计学意义[F(3,16)=61.89,P<0.0001],进一步两两比较,与CONT组相比,RS组和RS+MEL组的悬崖回避时间均明显延长(P<0.05);而与RS组相比,惊厥组大鼠经褪黑素长程干预后即RS+MEL组的悬崖回避时间明显缩短(P<0.05)。此外,与MEL组相比,RS组和RS+MEL组的悬崖回避时间均明显延长(P<0.05)。P53天四组大鼠悬崖回避时间存在显著性差异,差异有统计学意义[F(3,16)=114.6,P<0.0001],进一步两两比较,与CONT组相比,RS组和RS+MEL组的悬崖回避时间均明显延长(P<0.05);而与RS组相比,惊厥组大鼠经褪黑素长程干预后即RS+MEL组的悬崖回避时间明显缩短(P<0.05)。此外,与MEL组相比,RS组和RS+MEL组的悬崖回避时间均明显延长(P<0.05)。2.Morris水迷宫:⑴定位航行实验:四组大鼠水迷宫逃避潜伏期存在组间显著性差异[F(3,12)=71.29,P<0.0001],训练天数显著性差异[F(4,16)=153.7,P<0.0001]以及组间因素与训练天数的交互作用的显著性差异[F(12,48)=4.258,P=0.0001],差异具有统计学意义(P<0.01),两两比较发现:实验第1天至第5天,RS组逃避潜伏期较CONT组均明显延长(P<0.05)。实验第2天至第5天,惊厥组大鼠经褪黑素长程干预后即RS+MEL组逃避潜伏期较RS组均明显缩短(P<0.05),实验第2天,与CONT组比较,惊厥组大鼠经褪黑素长程干预后即RS+MEL组大鼠逃避潜伏期明显延长(P<0.05)。在实验第3至第5天,RS+MEL组与CONT组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常。⑵空间探索实验:四组大鼠穿越平台次数比较存在显著性差异[F(3,16)=28.53,P<0.0001],差异具有统计学意义(P<0.01)。两两比较发现,RS组和RS+MEL组大鼠穿越平台次数较CONT组均明显减少(P<0.05),而惊厥组大鼠经褪黑素长程干预后即RS+MEL组大鼠穿越平台次数较RS组明显增多(P<0.05),其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。3.旷场实验:⑴延迟时间:四组大鼠旷场实验延迟时间存在组间显著性差异[F(3,12)=117.6,P<0.0001],及训练天数显著性差异[F(1,4)=1184,P<0.0001],差异具有统计学意义(P<0.01),而组间因素与训练天数的交互作用无显著性差异[F(3,12)=0.5514,P=0.6568>0.05]。两两比较发现:与CONT组相比,RS组延迟时间(P61、P62)明显延长(P<0.05);而与RS组相比,惊厥组大鼠经褪黑素长程干预后即RS+MEL组大鼠的延迟时间(P61、P62)明显缩短(P<0.05),而RS+MEL组与CONT组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常,其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。⑵开场得分:四组大鼠旷场实验开场得分存在组间显著性差异[F(3,12)=238.3,P<0.0001],及组间因素与训练天数的交互作用显著性差异[F(3,12)=4.866,P=0.0193],差异具有统计学意义(P<0.05),而训练天数无显著性差异[F(1,4)=0.045,P=0.8416>0.05]。两两比较发现:与CONT组相比,RS组和RS+MEL组的开场得分(P61、P62)均明显降低(P<0.05);与RS组相比,惊厥组大鼠经褪黑素长程干预后即RS+MEL组大鼠的开场得分(P61、P62)明显升高(P<0.05)其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。4.惊厥阈及存活率结果显示:⑴惊厥阈:与CONT组相比,RS组和RS+MEL组大鼠的惊厥阈明显降低(P<0.05),而与RS组相比,惊厥组大鼠经褪黑素长程干预后即RS+MEL组大鼠的惊厥阈明显升高(P<0.05)。此外,与MEL组相比,RS组和RS+MEL组大鼠的惊厥阈明显降低(P<0.05)。⑵存活率:CONT组(80%)、MEL组(87%)、RS组(46.7%)、RS+MEL组(53.3%)。5.Timm染色结果显示:单纯惊厥组(RS组)CA3区始层和齿状回内分子层苔藓纤维发芽程度较单纯对照组(CONT组)显著升高(P<0.01),而惊厥组大鼠经褪黑素长程干预后即RS+MEL组CA3区始层和齿状回内分子层苔藓纤维发芽程度较单纯惊厥组(RS组)明显降低(P<0.05),而RS+MEL组与CONT组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常,其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。6.Western blot显示:⑴海马:与CONT组相比,RS组ZIP7、Apo A1、P53、P62、Beclin1、Beclin1/Bcl-2、LC3Ⅱ/Ⅰ、Cathepsin E在海马中的表达均明显升高(P<0.05),Zn T1、c PLA2、Bcl-2在海马中的表达明显降低(P<0.05);而与RS组相比,惊厥组大鼠经褪黑素长程干预后即RS+MEL组ZIP7、Apo A1、P53、P62、Beclin1、Beclin1/Bcl-2、LC3Ⅱ/Ⅰ、Cathepsin E在海马中的表达均明显降低(P<0.05),Zn T1、c PLA2、Bcl-2在海马中的表达明显升高(P<0.05),而RS+MEL组与CONT组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常,其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。⑵大脑皮质:与CONT组相比,RS组ZIP7、Apo A1、P53、P62在大脑皮质中的表达均明显升高(P<0.05),Zn T1、c PLA2、Bcl-2在大脑皮质中的表达明显降低(P<0.05);而与RS组相比,惊厥组大鼠经褪黑素长程干预后即RS+MEL组ZIP7、Apo A1、P53、P62、Beclin1、Beclin1/Bcl-2、LC3Ⅱ/Ⅰ、Cathepsin E在大脑皮质中的表达均明显降低(P<0.05),Zn T1、c PLA2、Bcl-2在大脑皮质中的表达明显升高(P<0.05),而RS+MEL组与CONT组比较无显著性差异(P>0.05),趋于正常,其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.褪黑素长程干预对新生期惊厥性脑损伤远期神经行为、认知、海马苔藓纤维异常发芽、惊厥阈和存活率有干预作用,即褪黑素长程干预可减轻远期神经行为、认知的损伤,抑制海马苔藓纤维异常发芽,提高惊厥阈和存活率。2.褪黑素长程干预能显著下调新生期惊厥导致的ZIP7、Apo A1、P53、P62、Beclin1、Beclin1/Bcl-2、LC3Ⅱ/Ⅰ、Cathepsin E在海马及大脑皮质表达的升高,上调Zn T1和c PLA2、Bcl-2表达的降低。3.本研究采用二次打击惊厥模型初步表明,褪黑素长程干预可能通过锌-脂质过氧化-自噬信号通路发挥对新生期惊厥性脑损伤的神经保护作用。