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【目的】应用维生素D3联合高浓度胆固醇饲料,将SD大鼠饲养90天以建立AS模型,探讨AS形成过程中NO/iNOS系统的变化,以进一步了解NO/iNOS与AS间的关系。【方法】通过对大鼠以60万IU/kg/d的剂量,在实验开始前4天连续腹腔注射维生素D3,之后每30天以30万IU/kg/d的剂量方式腹腔注射,并联合高脂饲料饲养90天,以建立AS模型。根据时间分三组:对照组,45d组和90d组。并检测血清TC、TG、GLU、Ca2+和HDL-C浓度,采用比色法检测血清NO浓度,HE染色法检测主动脉、心脏及肾脏在AS过程中的动态病理变化,免疫组化技术检测动脉粥样斑块中iNOS蛋白的表达,并将所得数据进行统计分析。【结果】(1)从0周到12周过程中,大鼠体重未见明显改变。但与0周组相比,1周组的体重稍有下降,差异有统计学意义(164.05±12.35g对182.46±18.79g, P <0.05)。(2)血清GLU浓度在整个AS过程中呈上升趋势。血清GLU在三组间比较,其中45d组GLU浓度与对照组比较(P <0.01),90d组GLU浓度与正常组比较(P <0.01),90d组GLU浓度与45d组比较(P <0.01)。(3)血清TC在45d组和对照组间的比较,前者水平更高(P <0.01),TC浓度在对照组与90d组两组间比较,后者水平更高(P <0.01),而该浓度值在45d组和90d组间比较,差异无统计学意义(P <0.01)。(4)45d组血清TG水平显著高于对照组(P <0.01),90d组TG水平高于对照组(P <0.01),对照组与90d组比比较(P>0.05)。(5)血清HDL-C水平对照组高于45d组(P <0.01),低于90d组(P <0.01),而90d组水平HDL-C水平高于45d组(P <0.01)。(6)血清LDL-C水平在45d组中最高,在对照组中最低。与对照组相比,LDL-C水平在45d组(P <0.01)及90d组(P <0.01)中显著增高。但是90d组水平低于45d组(P <0.01)。(7)与对照组比较,血清钙离子水平在45d组和90d组显著增高(均P <0.01),且45d组较90d组该水平更高(P <0.01)。(8)动脉粥样硬化指数在45d组(P <0.01)与90d组(P <0.01)高于对照组,与45d组相比,90d组其水平较低(P <0.01)。(9)与对照组相比,HDL-C/LDL-C比值在45d组(P <0.01)及90d组(P <0.01)中显著降低,在45d组中降低得尤为显著。(10)血清NO水平在对照组中显著高于45d组(P <0.01)及90d组(P <0.01)。而90d组其水平是三组中最低。(11)对三组资料经Pearson相关分析: AI与TC,LDL-C,Ca2+,TG,HDL-C,HDL-C/LDL-C有相关性(r=0.825,0.890,0.726,-0.787,-0.532,-0.861,P <0.05);NO与GLU,TC,TG,LDL-C,HDL-C,HDL-C/LDL-C,Ca2+有相关性(r=-0.903,-0.700,0.717,-0.648,-0.389,0.614,-0.382,P <0.05);但是AI与NO及GLU无相关性。(12)对45d组和90d组资料进行Pearson相关分析:NO与GLU,HDL-C,AI,TC,LDL-C,Ca2+,HDL-C/LDL-C有相关性(r=-0.874,-0.719,0.829,0.045,0.655,0.504,-0.775,P <0.05),但NO与TG无相关性。(13)多元逐步回归分析显示:在对照组,45d组及90d组三组中,在校正了其他因素后,AI与HDL-C呈独立负相关(β=-0.628,P=0.000),AI与TC呈独立正相关(β=1.050,P=0.000),其中HDL-C对AI的影响较大。同样NO仍与GLU呈独立负相关(β=-0.783,P=0.000)。(14)通过对45d组及90d组进行多元逐步回归,NO仍与GLU(β=-0.813,P=0.000)及TC(β=0.224,P=0.047)有相关性,且TC对NO的影响更大。(15)在90天内,逐渐出现AS,且病理结果为主动脉中膜的钙化性硬化。心肌病理检查提示斑块破裂极易导致心肌梗死发生。肾脏病理检查还显示在AS模型鼠的肾小管中出现较多管型。(16)在90d的模型组的粥样斑块区通过免疫组化技术检测到有iNOS蛋白表达,动脉粥样硬化过程中iNOS表达逐渐减少。【结论】1)维生素D3合并高浓度胆固醇饲料饲养,90天可成功建立主动脉中膜钙化型AS模型。2)在AS过程中, NO/iNOS系统的功能降低,NO/iNOS系统在AS过程中的抗动脉粥样硬化作用逐渐减弱。综合机制有待进一步研究。3) AS斑块的破裂易导致心肌梗死的发生。4) AS形成过程中,反映AS严重程度的指标AI与LDL-C和Ca2+呈正相关,与TC呈独立正相关,与HDL-C呈负相关,且HDL-C对AI的影响最大,HDL-C是AS的保护因素。5)长期的高胆固醇血症和高钙血症导致的钙超载可导致肾功能损伤,具体机制有待进一步探究。