食源性致病菌是以食物为载体,导致人类发生疾病的细菌。针对传统的细菌检测方法,如生化培养、分离鉴定、免疫学技术等,操作繁琐,需时长、特异性不强、灵敏度不高等问题,本研究在进行特异性引物设计后,建立起沙门氏菌（Salmonella sp.）、志贺氏菌（Shigella sp.）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）、肠出血型大肠杆菌O157（EterohaemorrhagicEHEC）和副溶血弧菌（Vibrio rahaemolyticus）等5种致病菌的单重及多重PCR检测技术,通过优化测定条件,对10个属的35株常见致病菌、条件致病菌和实验室人工污染的饮用水、河水、池塘水等样本进行检测,这5种致病菌均有清晰、特异的预期条带产生,并经序列测定验证同源性,表明本研究建立的反应体系及条件合适,筛选的引物高度特异。采用PCR技术对5种致病菌进行检测,每个样品所需时间为5⁸h,单重PCR技术检测灵敏度分别为:肠出血型大肠杆菌O157 10⁰cfu.mL^-1、志贺氏菌10⁰cfu.mL、副溶血弧菌10¹cfu.mL^-1、铜绿假单胞菌10⁰cfu.mL^-1、沙门氏菌10¹cfu.mL^-1;多重PCR技术检测灵敏度分别为:肠出血型大肠杆菌O1571O¹cfu.mL^-1、志贺氏菌10²cfu.mL^-1、副溶血弧菌10²cfu.mL^-1、铜绿假单胞菌10²cfu.mL^-1、沙门氏菌10¹cfu.mL_<sup>-1.相对于传统检测方法,本研究极大地缩短了检测时间,适用于大通量样品的检测研究。此外,本研究在建立了检测的优化体系和条件的基础上,构建了单重PCR和多重PCR.检测试剂盒,可推广应用于环境监测、水源检测、食品卫生监督、商品检验检疫等领域。