肺癌患者血清HBXAP DNA检测及其临床意义分析

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目的构建pMD18-T-HBXAP质粒作为标准品,建立SYBR Green实时荧光定量聚合酶链反应法,检测肺癌患者血清HBXAP DNA浓度,并分析其临床意义。方法1.提取血清DNA,构建重组质粒pMD18-T-HBXAP作为标准品进行定量检测。设计针对HBXAP DNA的引物,建立SYBR GreenFQ-PCR方法检测血清HBXAP DNA浓度,并进行线性范围、精密度和特异性等方面的评价。2.收集65名肺癌患者静脉血及相应的临床资料,20名健康体检者静脉血作对照。提取血清DNA,利用FQ-PCR方法定量检测血清HBXAP DNA水平,分析发现:肺癌患者血清HBXAP DNA浓度较健康对照组高,TNM分期Ⅲ-Ⅳ肺癌患者血清HBXAP DNA浓度显著高于Ⅰ-Ⅱ期肺癌患者,且伴有淋巴结转移的肺癌患者血清HBXAP DNA浓度显著高于不伴有淋巴结转移的肺癌患者;HBXAP DNA联合现有肺癌标志物(SCC、CYFRA21-1、NSE)可显著提高对肺癌诊断的敏感性。结果1.成功构建重组质粒pMD18-T-HBXAP,并成功建立FQ-PCR方法,检测肺癌患者和健康对照组血清HBXAP DNA浓度。2.血清HBXAP DNA与肺癌患者临床特征及现有肺癌标志物的关系分析:(1)肺癌患者血清HBXAP DNA浓度{2171.0(633.0,5366.7)copies/μl}显著高于健康对照组血清HBXAP DNA浓度{720.7(345.2,1240.6)copies/μl},差异具有统计学意义(p=0.001)。(2)TNM分期Ⅲ-Ⅳ期的肺癌患者血清HBXAP DNA浓度显著高于Ⅰ-Ⅱ期肺癌患者,伴有淋巴结转移的肺癌患者血清HBXAP DNA浓度显著高于不伴淋巴结转移的患者,差异具有统计学意义(P=0.015,P=0.016)。(3)在ROC曲线中,AUC为0.767(95%CI:0.664-0.870)。当依据约登指数最大法选取1557.6copies/μl作为最佳截断值时,HBXAP DNA诊断肺癌的敏感性和特异性分别为61.9%和93.7%。(4)在单独诊断肺癌时,HBXAP DNA的敏感性最高,(61.9%),且当HBXAP DNA与现有的肺癌标志物(如SCC、CYFRA21-1、NSE)联合时可显著提高肺癌诊断的敏感性。结论成功建立了FQ-PCR定量检测血清HBXAP DNA的方法。血清HBXAP DNA浓度在TNM分期Ⅲ-Ⅳ期、伴有淋巴结转移的肺癌患者中显著增高,HBXAP DNA联合现有肺癌标志物可显著提高对肺癌诊断的敏感性。利用FQ-PCR技术定量检测血清HBXAP DNA浓度有望成为临床上肺癌诊断的辅助标志物。
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