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目的 将原核表达的NPRL2(Nitrogen permease regulator 2-like)融合蛋白通过胞浆转导肽(Cytoplasmic transduction peptide,CTP)转入到肾癌原代细胞胞浆内,观察其对肾癌原代细胞迁移侵袭能力的影响,并观察其与肾癌的上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系。方法 分别使用IV型胶原酶消化与在滤网上研磨的方法培养肾癌原代细胞;构建原核表达质粒p ET15b-CTP-NPRL2和p ET15b-NPRL2,表达融合蛋白CTP-NPRL2和NPRL2,并通过western blot鉴定融合蛋白的表达。通过免疫荧光实验检测融合蛋白的定位情况;通过迁徙侵袭实验检测导入融合蛋白后,对肾癌原代细胞的影响;Real-Time PCR检测Raptor、E-cadherin、Vimentin、Fibronectin m RNA表达水平;Western Blot检测Raptor、E-cadherin、Vimentin、Fibronectin蛋白表达水平。结果 培养出肾癌原代细胞并通过流式细胞术与免疫组化鉴定;Western Blot结果提示重组质粒成功表达出目的融合蛋白;免疫荧光提示CTP-NPRL2融合蛋白可以穿过胞膜并定位于胞浆;迁移和侵袭实验显示CTP-NPRL2组肾癌细胞迁移侵袭能力明显降低;Real-Time PCR和Western Blot显示CTP-NPRL2组Raptor、Vimentin与Fibronectin的m RNA、蛋白表达水平与NPRL2组和BLANK组相比降低(P<0.05),而E-cadherin的m RNA、蛋白表达水平与NPRL2组与BLANK组相比升高(P<0.05)。结论 NPRL2可以影响肾癌原代细胞迁移能力,可能是通过对Raptor表达的影响,改变m TORC1活性,进而调节EMT相关蛋白的表达量,改变了EMT进程,进而影响肾癌原代细胞的迁移侵袭能力。