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目的 本研究通过脂多糖(LPS)刺激小鼠腹腔巨噬细胞诱发与临床SIRS相似的模型，观察小鼠巨噬细胞促炎性细胞因子TNF-α，IL-6和IL-8 mRNA表达水平与LPS刺激浓度及时间的关系，研究不同静脉麻醉药在不同浓度下通过影响NF-κB的活性调控TNF-α，IL-6和IL-8 mRNA的表达，以期探讨静脉麻醉药对SIRS中促炎性细胞因子的影响作用及其可能的分子机制，为整体实验提供研究思路和理论依据，并寻求其潜在的临床价值。方法 分离小鼠腹腔巨噬细胞，用完全RPMI1640培养基培养后接种于6孔板，进行以下实验：1．观察LPS刺激对促炎性细胞因子mRNA表达的浓度依赖性。巨噬细胞随机分为6组，分别用不同浓度的LPS孵育4小时后用RT-PCR法检测TNF-α，IL-6，IL-8 mRNA表达水平。2．观察LPS刺激对促炎性细胞因子mRNA表达的时间依赖性。巨噬细胞随机分为6组并用10ng／ml的LPS孵育细胞，分别于1-6小时后用RT-PCR法检测TNF-α，IL-6和IL-8 mRNA表达水平。3．研究不同浓度下异丙酚、氯胺酮、硫喷妥钠、咪唑安定和依脱咪酯对细胞因子mRNA表达及NF-rJ3活性的影响。巨噬细胞随机分为七组。A：阴性对照组B：阳性对照组，LPS 10ng／ml孵育细胞C：单用静脉麻醉药组D，E，F，G组：四种浓度的上述静脉麻醉药+LPS组，静脉麻醉药孵育2小时后加入LPS 10ng／ml继续孵育1-4小时。1小时后用RT-PCR法检测TNF-α mRNA的水平，Wesrten blot法检测磷酸化的NF-κ3 P65亚基水平和IκB水平；4小时后用RT-PCR法检测IL-6，IL-8 mRNA的水平。实验结果：1．TNF-α，IL-6和IL-8 mRNA表达水平在LPS刺激浓度为10ng／ml时达到峰值。2．在10ng／mlLPS刺激下，TNF-α，IL-6和IL-8 mRNA表达水平分别于1小时、4小时、6小时达到峰值。3．异丙酚(0.5，5，50及500μg／ml)可以下调LPS刺激后上升的TNF-α，IL-6 mRNA水平，并表现出浓度依赖性；而IL-8 mRNA及磷酸化NF-κB p65，IκB的水平无明显变化；中国人民解放军军医进修学院硕士研究生论文4.相对LPS刺激组，LPS十20，200及500卜留ml氯胺酮组TNF一a mRNA的水平降低，磷酸化NF一沼p65的水平降低，I沼的水平升高;LPs十200协留ml，500林留ml氯胺酮组IL一6和IL一8 mRNA的水平降低，并呈浓度依赖性;5.同内毒素组比较，500林留ml和lmg/ml硫喷妥钠组TNF一a mRNA的水平降低，磷酸化NF一虑p65的水平降低，I忍的水平升高。6.同内毒素刺激组比较，1，10和100林留ml的咪哇安定IL一8 mRNA水平增高;而TNF一a，IL一6 mRNA及磷酸化NF一虑p65、I忍的水平无明显变化。7.同内毒素刺激组比较，不同浓度的依脱咪醋翎F一a，IL一6，lL一8 mRNA及磷酸化NF一沼p65、I出的水平无明显变化。结论:临床相关浓度的异丙酚能够有效抑制内毒素刺激下小鼠巨噬细胞促炎性细胞因子的表达并呈浓度依赖性，但并不是通过影响NF一出的活性而调控的;氯胺酮和硫喷妥钠能够抑制内毒素刺激下小鼠巨噬细胞促炎性细胞因子的表达，并通过抑制NF一沼的活性进行调控;咪哇安定和依脱咪醋对内毒素刺激下小鼠巨噬细胞促炎性细胞因子的表达和NF一沼的活性没有明显影响。