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贾第鞭毛虫(简称贾第虫)是一类呈世界性分布的重要人兽共患寄生原虫,能广泛寄生于人、哺乳动物、鸟类、两栖类及啮齿类动物的肠道,引起腹痛、腹泻和消化不良等症状。该病已被列为全世界危害人类健康的10种主要寄生虫病之一。为了解广州市犬贾第虫的感染情况及其基因型,并建立可视化的LAMP检测方法,本论文进行了以下三个方面的研究: 第一部分对广州市犬源贾第虫bg和EF1α基因部分序列进行PCR扩增、克隆、测序及序列分析,结果显示,bg和EF1α基因序列长度分别为384 bp和288 bp,用DNAStar软件建立遗传关系树,结果显示,本次分离的犬源贾第虫分离株为蓝氏贾第虫D型,为犬贾第虫常见基因型。结果表明bg和EF1α均适合做分子标记,可准确对贾第虫进行基因型鉴定。 第二部分采用形态学和PCR方法对广州市天河区和番禺区209只宠物犬进行了贾第虫的感染情况调查,结果显示,宠物犬总感染率分别为8.61%(18/209)和11.00%(23/209),其中腹泻犬的感染率为26.31%,明显高于未腹泻犬(5.10%);幼龄犬感染率为25.58%,明显高于成年犬(7.37%)和老龄犬(7.04%);此外,雄性犬感染率为11.30%(13/115),略高于雌性犬10.87%(10/92);郊区犬感染率为12.15%,高于市区犬9.80%。基因型鉴定结果显示,23份贾第虫样品中,5份为人兽共患基因型A型(21.74%),18份为犬特异性基因型D型(78.26%)。 第三部分根据EF1α基因设计6条特异引物,成功建立了贾第虫的可视化LAMP检测方法。特异性试验结果显示,犬源贾第虫检测管显色后呈阳性,而弓形虫、新孢子虫、微小隐孢子虫及艾美尔球虫等对照组均呈阴性。该方法可以成功检测粪便中的贾第虫,敏感性为10-4ng/μL,比常规PCR方法高10倍;此外,具有操作简单、检测快速等特点,可以为犬源贾第虫的分子检测及流行病学调查提供技术支撑。