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反刍动物瘤胃关键微生物与宿主生长发育及其免疫状况直接相关,瘤胃微生物区系的可调控性为菌群移植提供了理论基础。但是,瘤胃菌群复杂多样,且反刍动物个体差异大,致各研究中关键微生物不完全一致,同时对菌群调控宿主生长性能的机理研究较少。因此,通过菌群移植寻找促进青年奶山羊生长发育的关键瘤胃微生物,并探讨其作用机理十分必要。本文通过瘤胃液微生物移植,改变受体消化道优势菌群结构,探究菌群调控宿主瘤胃发酵和脂质代谢的机理。试验一不同日增重奶山羊瘤胃液微生物移植影响受体羊菌群结构和发酵模式本研究从110只健康的6月龄青年奶山羊中选取5只平均日增重最高(147.4±2.19g)的青年奶山羊作为瘤胃液供体,日增重较低(107.8±3.58 g)的12只羊为瘤胃液受体,受体羊随机分为2组,每组6只。对照组(GC组)口腔灌服灭菌生理盐水50 m L/只,试验组(GR组)灌服等量供体羊瘤胃液,每天灌服一次,试验周期30 d。记录每周奶山羊的体重变化,采集瘤胃液和血液样品,测定瘤胃发酵参数和血液生化指标,并利用16S r RNA测序技术检测菌群移植对瘤胃微生物区系的影响。结果显示:1)瘤胃菌群移植未显著改变青年羊平均日增重(P>0.05);2)试验组瘤胃液戊酸比例显著升高(P<0.05),乙酸和异戊酸比例显著降低(P<0.05),丙酸比例有升高的趋势(0.05<P<0.10),乙丙比有下降的趋势(0.05<P<0.10);3)两组青年羊瘤胃菌群结构存在显著差异(P<0.05),而菌群丰度和多样性差异不显著(P>0.05)。灌服供体羊瘤胃液可显著降低与平均日增重呈显著负相关菌(Prevotella 1、Prevotellaceae UCG-003)的相对丰度(P<0.05),显著提高与平均日增重呈正相关菌(Candidatus Saccharimonas、Ruminococcus 2、Ruminococcus gauvreauii group)的相对丰度(P<0.05),但Streptococcus、Succinivibrionaceae UCG-001相对丰度无显著差异(P>0.05)。4)试验组血浆总胆固醇、低密度胆固醇和高密度胆固醇显著升高(P<0.05),甘油三酯和血浆葡萄糖无显著影响(P>0.05)。本试验结果表明,瘤胃液可作为菌群移植的载体改变受体羊瘤胃菌群结构,增加与平均日增重呈正相关菌的相对丰度,减少瘤胃乙酸发酵,向有利于丙酸发酵的方向变化。试验二奶山羊关键瘤胃微生物定植大鼠并促进结肠纤维发酵试验一中与平均日增重正相关的菌丰度显著升高,但试验组奶山羊平均日增重无明显变化。为了进一步观测消化道菌群结构改变是否影响受体动物的生长性能及可能的作用机制,利用成熟的模式动物-SD大鼠开展下述试验。选取6月龄平均日增重最高和最低的奶山羊各10头,采集瘤胃液后利用悬浮离心方法获取瘤胃液微生物,20%甘油冻存备用。将20只3周龄雌性SD大鼠(50±10 g)随机分两组,预饲3 d后,连续饲喂7 d抗生素,之后进入正试期(21 d)。两组大鼠分别灌服日增重低的奶山羊瘤胃菌群(RS组)、日增重高的奶山羊瘤胃菌群(RF组),每天1 m L/只,连续灌服14 d后隔1 d灌服一次。记录采食量和每周大鼠的体重变化,检测大鼠结肠食糜短链脂肪酸含量,利用16S r RNA测序技术检测瘤胃微生物移植对大鼠结肠微生物区系的影响。试验结果显示:1)灌服21 d两组大鼠平均日增重无显著差异(P>0.05),平均日采食量RF组相比于RS组有增加的趋势(P=0.085);2)RF组大鼠结肠发酵产物丙酸、丁酸和总挥发酸浓度显著升高(P<0.05),乙酸浓度有升高的趋势(P=0.094);3)RF组与RS组菌群丰度和多样性无显著差异(P>0.05),但在属水平菌群结构存在显著差异(P<0.05),RF组大鼠与平均日增重呈正相关菌(Bifidobacterium、Christensenellaceae R-7 group)的相对丰度显著升高(P<0.05),Candidatus Saccharimonas相对丰度有升高的趋势(P=0.066),与平均日增重呈显著负相关菌(Ruminococcaceae)的相对丰度有降低的趋势(P=0.095)。综上,灌服不同日增重青年羊瘤胃菌群显著改变SD大鼠结肠菌群结构,瘤胃关键微生物部分成功定植SD大鼠,促进其结肠丙酸发酵,利用大鼠模型进行机制验证具有可行性。试验三瘤胃微生物发酵产物对SD大鼠肝脏脂质代谢的影响在试验二基础上,通过分析SD大鼠血液生化、肝脏脂代谢相关基因表达情况、脂肪组织HE染色等指标,揭示瘤胃关键微生物对奶山羊生长发育的调控机制。结果显示:1)RF组大鼠血浆中甘油三酯含量升高(P<0.05),肝脏甘油三酯和总胆固醇含量无显著差异(P>0.05);2)RF组大鼠肝脏LXRα表达量显著升高(P<0.05),脂肪酸β氧化基因PPAR-α、CPT-1α表达量无显著变化(P>0.05);脂肪酸从头合成基因SCD-1表达量显著升高(P<0.05),ACC、FAS表达量无显著变化(P>0.05);3)移植高日增重奶山羊瘤胃微生物可促进大鼠白色脂肪组织沉积。结果表明:瘤胃微生物及其代谢产物,通过促进肝脏脂肪酸从头合成,增加机体脂沉积。本研究表明,通过移植瘤胃液微生物,可改善受体动物消化道微生物区系,促进瘤胃丙酸发酵和肝脏脂肪酸从头合成,提高能量利用效率,增加机体脂质沉积,调控青年奶山羊生长发育。