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目的:研究在烟曲霉菌(Aspergillus fumigatus,AF)性角膜炎中JNK的磷酸化在Dectin-1介导的IL-1β生成中的作用以及Dectin-1对细胞凋亡的影响。方法:1.采用基质内注射的方法建立12h、1d、2d小鼠烟曲霉菌性角膜炎动物模型,采用PCR、Western Bolt对Dectin-1和IL-1β的表达进行定量检测,采用免疫荧光对Dectin-1的蛋白表达进行定位检测。2.Dectin-1 siRNA对小鼠角膜进行预处理,建立小鼠烟曲霉菌性角膜炎动物模型,裂隙灯下观察小鼠角膜炎症反应情况并记录临床评分,PCR或Western Bolt检测Dectin-1、JNK、p-JNK、IL-1β表达。3.JNK抑制剂SP600125对小鼠角膜和THP-1巨噬细胞进行预处理,建立烟曲霉菌感染模型之后,PCR、Western Bolt对IL-1β的表达进行检测。4.Dectin-1 siRNA对小鼠角膜进行预处理,建立小鼠烟曲霉菌性角膜炎动物模型。PCR、Western Bolt对Bcl-2、Bax、细胞色素c(cytochrome-c,cyt-c)、caspase-8、caspase-9、caspase-3进行检测。结果:1.与正常对照组相比,Dectin-1 mRNA在烟曲霉菌感染小鼠角膜12h(p<0.001)、1d(p<0.001)、2d(p<0.001)后表达明显升高,Dectin-1蛋白在烟曲霉菌感染小鼠角膜12h(p<0.05)、1d(p<0.001)、2d(p<0.001)后表达明显升高。IL-1βmRNA在烟曲霉菌感染小鼠角膜12h(p<0.001)、1d(p<0.001)、2d(p<0.001)后表达明显升高。IL-1β蛋白在烟曲霉菌感染小鼠角膜12h(p<0.001)、1d(p<0.001)、2d(p<0.001)后表达逐渐升高。2.Dectin-1 siRNA对小鼠角膜进行预处理,建立小鼠烟曲霉菌性角膜炎动物模型后,与对照siRNA+AF组相比,Dectin-1 siRNA+AF组小鼠角膜炎症反应减轻,临床评分降低(p<0.05),JNK的磷酸化减少(p<0.001),IL-1β的表达在mRNA(p<0.001)和蛋白(p<0.001)水平上显著降低。3.SP600125预处理小鼠角膜和THP-1巨噬细胞后建立烟曲霉菌感染模型。在动物模型中,SP600125+AF组与DMSO+AF组相比,IL-1β在mRNA(p<0.001)和蛋白(p<0.001)水平上表达明显降低。在细胞模型中,SP600125+AF组与DMSO+AF组相比,IL-1β在mRNA(p<0.001)和蛋白(p<0.001)水平上表达明显降低。4.Dectin-1 si RNA对小鼠角膜进行预处理,建立小鼠烟曲霉菌性角膜炎动物模型后,Dectin-1 siRNA+AF组与对照siRNA+AF组相比,Dectin-1干扰并未明显影响caspase-8 mRNA表达(P>0.05)和cleaved-caspase-8蛋白表达(P>0.05),差异无统计学意义;Bcl-2在mRNA(p<0.001)和蛋白(p<0.001)水平上表达下降;而Bax(p<0.001)、cyt-c(p<0.05)、caspase-9(p<0.001)、caspase-3(p<0.001)在mRNA水平上的表达上升,Bax(p<0.001)、cyt-c(p<0.001)、cleaved-caspase-9(p<0.001)、cleaved-caspase-3(p<0.001)在蛋白水平上的表达上升。结论:小鼠烟曲霉菌性角膜炎中Dectin-1调控JNK的磷酸化和IL-1β的产生,磷酸化的JNK诱导IL-1β的生成。Dectin-1通过线粒体途径抑制小鼠烟曲霉菌性角膜炎中细胞的凋亡。