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植物在生长发育过程中经常受到生物和非生物胁迫因素的影响,为了适应逆境条件,植物已经进化出一套复杂的、综合的调控系统,在此系统中WRKY转录因子家族起着重要的调节作用,其中包括调控胁迫相关基因的表达来应对外界不良环境。WRKY转录因子具有多种生物学功能,是植物特异性转录调控因子,对植物的逆境胁迫应答反应、生长发育和形态建成等生理过程起着重要的作用。目前在拟南芥、水稻、大豆和小麦等植物中,WRKY转录因子与植物生物胁迫研究取得了重要的进展,然而在烟草中与逆境胁迫相关的WRKY转录因子研究报道较少。本研究克隆了烟草中的一个WRKY家族成员,并对该基因进行了生物信息学分析和表达模式分析。主要研究如下：(1)利用同源性克隆方法,从野生烟草NaWRKY6同源克隆NtWRKY6基因,通过生物信息学分析,表明该基因的编码区长度为1647bp,编码548个氨基酸,有2个WRKY结构域,属于第Ⅰ类WRKY蛋白。与辣椒、番茄的WRKY基因序列同源性87%以上。同源性分析表明克隆的基因与拟南芥转录因子基因AtWRKY6有较高的同源性,与NtWRKYl序列同源性为97%,因此我们推测其可能为NtWRKY6o(2)构建NtWRKY6基因的pGBKT7载体,转化酵母菌株AH109,结果表明该转录因子具有转录激活活性。(3)通过半定量RT-PCR对NtWRKY6基因进行非生物胁迫响应的情况分析表明：在低钾胁迫下,3h内NtWRKY6的表达量高,3h后表达量开始降低,12h后表达量趋于稳定。说明NtWRKY6能响应低钾胁迫；NtWRKY6在低磷处理12h后表达量增加,24h表达量更高,说明NtWRKY6在低磷胁迫下被诱导表达；NtWRKY6在盐胁迫3h后表达量增加,12h后达到稳定水平,说明NtWRKY6受盐胁迫的诱导；在10%PEG模拟干旱胁迫处理下,NtWRKY6在0-24h表达量差异不显著。(4)构建NtWRKY6-pBI121过表达载体,将其转入到农杆菌LBA4404中,通过菌落PCR鉴定阳性克隆。采用叶盘转化法进行转基因操作,经抗性筛选获得转基因株系,抗逆相关基因的表达水平在转基因株系中比野生型高,为后续功能的研究奠定坚实的基础。