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目的通过研究TCMAI对奶牛乳腺炎耐药菌的体内外抗菌活性、临床疗效及对奶牛肝肾功能的影响及其肌肉刺激性和急性毒性,开展其在防治奶牛乳腺炎方面的有效性和安全性评价。分析TCMAI对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌生长及其超微结构的影响,探讨TCMAI的抗菌作用机制。方法全自动微生物分析系统和16S rDNA序列分析技术鉴定分离于四川成都、绵阳和眉山的奶牛乳腺炎病原菌,纸片扩散法分析其对8种抗菌药物的敏感性；琼脂平板二倍稀释法测定包括清热类、解表类、化湿类、收涩类等78味单味中药粗提物、4味中药抗菌活性部位和创新中兽药TCMAI对乳腺炎病原菌的体外抑菌活性；耐药金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌感染小鼠保护试验和奶牛乳腺炎临床试验研究TCMAI防治奶牛乳腺炎的有效性；肌肉刺激性试验、小鼠急性毒性试验及奶牛肝肾功能等血生化指标分析研究TCMAI的安全性；生长曲线法和电子显微镜技术探讨TCMAI的抗菌作用机制。结果分离鉴定奶牛乳腺炎病原菌120株,其中15株(12.5%)对青霉素、链霉素、红霉素、四环素、庆大霉素、环丙沙星、头孢噻吩和头孢噻肟敏感,14株(11.67%)中介,91株(75.83%)耐药,以对青霉素(67.21%)和链霉素(64.81%)的耐药率最高,且多数耐药菌株呈多重耐药。清热解毒药拳参、清热燥湿药黄连、解表药香薷、化湿药厚朴、收涩药诃子和其它类药物地榆对奶牛乳腺炎耐药菌具有较强的体外抗菌活性。创新中兽药TCMAI除对受试的3株单胞菌无抑菌活性外,对其余15个种属的117株耐药菌和敏感菌均有较强的体外抑菌活性,MIC为0.26～8.17mg/ml; 0.49g/kg TCMAI肌肉注射对金黄色葡萄球菌耐药菌和大肠埃希菌耐药菌感染小鼠有100%的保护力,并呈量效关系；4.08mg/kg TCMAI乳池灌注和肌肉注射对19头奶牛26个乳区临床型乳腺炎奶牛的头治愈率和乳区治愈率分别为89.47%和88.46%,总有效率为100%；乳区肿胀平均消除时间为2.1d。TCMAI对4只兔肌肉刺激性试验的总反应分值为8分,肌肉注射和腹腔注射小鼠的LD5o分别为1.873g/kg和0.442g/kg。亚抑菌浓度TCMAI能明显延长金黄色葡萄球菌的迟缓期,延缓其生长速度,繁殖方式异常,出现三分裂、四分裂等多种分裂方式,胞壁和胞膜损伤,胞浆内容物溶解,细胞空化死亡；亦能明显延长大肠埃希菌的迟缓期,显著减少其生长量,损伤胞膜,胞浆内容物渗漏,细胞空化死亡结论TCMAI具有广谱抗菌活性,安全性高、毒副作小,对奶牛乳腺炎耐药菌具有极强的体内、外抗菌活性,对临床型乳腺炎的治愈率高,能用于治疗各种耐药菌和敏感菌引起的临床型乳奶牛乳腺炎。