H1N1甲型流感—猪瘟病毒双价活载体疫苗研制

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猪瘟(Classical swine fever CSF),又名猪霍乱或欧洲猪瘟,是一种高致病性,高致死率和高传染性的多系统出血性疾病。猪瘟病毒为其病原,该病的天然宿主为家猪和野猪,历史上有过多次的猪瘟的大爆发,每一次的爆发都会造成巨大的经济损失,对各国的家猪养殖业和国际间的猪产品贸易危害极大,被世界动物卫生组织(OIE)列为A类传染病。猪瘟病毒属于黄病毒科(Flaviviridae family),瘟病毒属(Pestivirusgenus)。猪瘟病毒是单股正链RNA病毒,病毒颗粒的直径大小为40–60nm,基因组大小为12.3kb。其外则具有包膜结构。猪瘟病毒的基因组主要包括一个5’端非编码区(5’UTR),其后面是一个巨大的开放阅读框(ORF)区,最后面则是一个3’端非编码区(3’UTR)。猪瘟病毒有4个结构蛋白:衣壳蛋白C,囊膜蛋白Erns, E1和E2。8个非结构蛋白:Npro, P7, NS2, NS3,NS4A, NS4B, NS5A和NS5B。目前我国预防猪瘟病毒所用的疫苗主要为1954年选育出“54-III系兔化毒”,即C株。C株以其免疫力强,保持效果持久,遗传性质稳定及无残余毒力等优点,在国际上被公认为效果最好的猪瘟弱毒疫苗,已经得到大面积推广和应用,在开发作为其他猪病疫苗载体方面也有很好的前景。流行性感冒病毒(influenza virus),属于正粘病毒科(Orthomyxoviridae)流感病毒分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型,是流行性感冒(流感)的病原体。上个世纪共发生过三次世界性的大流行:1918年,H1N1引起的西班牙流感,1957年H2N2引起的亚洲流感和1968年,H3N2引起的香港流感。进入到本世纪,2009年4月,一种新型的H1N1猪流感病毒在人类身上检测出来,并且于2009年9月份开始演变为世界性的大流感在人类中迅速传播。目前,全世界大流行的H1N1甲型流感正在威胁人类健康,对其病原分析发现该病毒与猪流感病毒有最高的核酸序列同源性,表明其起源于猪流感病毒。在我们投入大量的人力物力防控该病毒在人与人之间流行的时候,如何从源头上有效切断流感病毒从猪传染给人是必须考虑的问题。对于病毒性疾病,最有效的防控办法是用有效的疫苗预防接种,而目前我国尚没有预防猪的H1N1甲型流感的正规疫苗可用。因此,研发控制H1N1甲型流感病毒在猪与猪之间传播的疫苗迫在眉睫。本研究利用我们实验室已经构建的兔化弱毒株感染性cDNA以及从合作单位获得的H1N1的HA基因,构建猪瘟-H1N1甲型流感嵌合疫苗,以期在进行猪瘟计划免疫的同时,防控猪流感病毒,避免猪流感病毒在猪与猪之间传播,从而可能从源头上切断H1N1甲型流感病毒从猪传染给人的途径,为H1N1甲型流感病毒的防控奠定基础。同时,本研究建立的CSFV的实验室检测方法灵敏度非常高,能够准确的检测到PK-15细胞中CSFV的存在,为今后的以兔化弱毒株cDNA为载体的疫苗实验奠定了基础。
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