【摘 要】
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脂质参与调控昆虫虫体的水分平衡,对维持昆虫正常的生理活动,尤其是抵抗高温干旱等不良环境胁迫有着重要作用。载脂蛋白D(Apolipoprotein D,Apo D)以及极低密度脂蛋白(Very l
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脂质参与调控昆虫虫体的水分平衡,对维持昆虫正常的生理活动,尤其是抵抗高温干旱等不良环境胁迫有着重要作用。载脂蛋白D(Apolipoprotein D,Apo D)以及极低密度脂蛋白(Very low density lipoprotein,VLDLR)在昆虫的脂质代谢与运输过程中发挥重要作用。本文拟通过基因克隆、定量PCR以及RNAi等,对黄粉虫Tm Apo D与Tm VLDLR基因的表达特征以及基因功能进行研究,探索这两个基因与黄粉虫虫体水分平衡之间的关系,为提高黄粉虫在人工饲养过程中对湿度等外界条件的适应能力奠定基础。本论文得到的试验结果如下:扩增得到包含基因全长c DNA的Tm Apo D与Tm VLDLR基因。基因表达特征研究结果表明Tm Apo D与Tm VLDLR基因分别在脂肪体与头部高表达,与其它组织部位存在显著差异;其次Tm Apo D与Tm VLDLR基因分别在雌成虫期与1龄幼虫期高表达,与其它发育阶段存在显著差异。表明黄粉虫Tm Apo D与Tm VLDLR基因的表达具有组织特异性以及发育阶段特异性。低湿度胁迫导致黄粉虫Tm Apo D基因的相对表达量极显著高于对照组。利用RNAi技术沉默Tm Apo D基因会导致老熟幼虫的死亡率极显著升高。RNAi处理后,低湿度胁迫会导致老熟幼虫的死亡率极显著高于对照组,表明Tm Apo D基因参与黄粉虫老熟幼虫对低湿度胁迫的响应过程。RNAi处理第2天开始,老熟幼虫的日失重量均极显著高于对照组;并且实验组的失水率极显著升高,表明Tm Apo D基因会影响黄粉虫的生长发育并且参与调控虫体的水分平衡。黄粉虫Tm VLDLR基因的相对表达量在低湿度胁迫下呈现一个动态变化,其中第1天与第5天极显著降低,而第3天极显著升高。沉默Tm VLDLR基因会导致黄粉虫老熟幼虫的死亡率极显著升高,但低湿度胁迫对死亡率无显著影响。另外RNAi处理会导致老熟幼虫的日失重量极显著高于对照组;但实验组与对照组的失水率无显著影响。上述试验结果表明Tm VLDLR基因会影响黄粉的生长发育,但不参与调控虫体的水分平衡。
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