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福赛斯坦纳菌是慢性牙周炎重要的致病菌，但该菌在中国牙周健康者和慢性牙周炎患者中的分布情况还不清楚，福赛斯坦纳菌数量水平与不同牙周状况相关性的研究也较少。本研究分两部分分析了中国牙周健康者和慢性牙周炎患者龈下菌斑中福赛斯坦纳菌的检出率及其与临床指标的关系；建立了TaqMan实时荧光定量PCR定量检测龈下菌斑中福赛斯坦纳菌和总细菌量的方法，分析了细菌负荷与牙周状况的关系。1、采用16S rRNA PCR方法对111例牙周健康者、108例慢性牙周炎患者共327个龈下菌斑样本检测发现，健康者健康位点福赛斯坦纳菌的检出率10.8％，低于牙周炎病变位点福赛斯坦纳菌检出率56.5％(P＜0.001)。牙周炎患者相对健康位点福赛斯坦纳菌检出率为37％，低于牙周炎病变位点(P＜0.001)和健康者健康位点(P＜0.05)。提示龈下菌斑中福赛斯坦纳菌的存在与牙周炎症的发生有密切关系。2、慢性牙周炎患者龈下菌斑样本检测发现，随着牙周袋探诊深度和临床附着丧失的增加，福赛斯坦纳菌的检出率也升高，其spearman相关系数分别为0.46和0.52(P＜0.001和P＜0.05)。探诊出血位点福赛斯坦纳菌的检出率为60.2％，明显高于不出血位点的检出率7.3％(P＜0.001)。提示福赛斯坦纳菌在牙周的定植与牙周炎破坏程度、疾病活动性有密切关系。3、为获得实时荧光定量PCR绝对定量的标准品，利用pMD18-T载体，通过T-A克隆技术，构建含有福赛斯坦纳菌和真细菌靶基因的重组质粒。从含X-gal／IPTG的LB固体培养基上的蓝白斑筛选结果可以看到，福赛斯坦纳菌重组质粒抗生素筛选平板上全为白斑，没有出现兰斑；而真细菌重组质粒抗生素平板上蓝斑少而白斑多，且从几个白斑中提取到的质粒DNA凝胶电泳及测序鉴定，结果显示均含有目的片段，表明重组质粒构建成功，该构建重组质粒的方法简便而高效。4、采用TaqMan实时荧光定量PCR，对样本中福赛斯坦纳菌的数量和总菌量进行定量检测，并获得福赛斯坦纳菌在龈下菌斑中的比例。用含有福赛斯坦纳菌和真细菌靶基因的重组质粒建立定量标准。结果显示所设计的引物和探针具有良好的特异性及敏感性，可检测的质粒DNA浓度为10~2～10~7拷贝／μl(r=0.99)，该定量检测细菌的方法简单而快捷。慢性牙周炎患者病变位点福赛斯坦纳菌数量和总菌量均比健康者健康位点高(P＜0.001)，福赛斯坦纳菌在龈下菌斑中的比例也比健康位点高(P＜0.05)；细菌数量与探诊深度间呈正相关(P＜0.001)，福赛斯坦纳菌与PD的相关系数r=0.78，总细菌与PD的相关系数r=0.61；深牙周袋中有高水平的细菌定植，但不同牙周袋探诊深度之间，福赛斯坦纳菌在龈下菌斑中的比例没有显著差异(P＞0.05)。提示龈下菌斑中福赛斯坦纳菌的数量水平与牙周状况有密切关系。综上所述，本研究对中国汉族牙周健康者和慢性牙周炎患者龈下菌斑福赛斯坦纳菌检测，证实了福赛斯坦纳菌与中国人牙周炎发生及疾病严重程度有密切关系；并建立了TaqMan实时荧光定量PCR定量检测龈下菌斑中福赛斯坦纳菌和总菌量的检测方法，成功对福赛斯坦纳菌和龈下菌斑总菌量进行了检测。研究表明了龈下菌斑中福赛斯坦纳菌的定植水平与牙周炎发生、疾病严重程度有关。实时荧光定量PCR方法对于牙周病病因及治疗研究具有很好的应用价值。