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口服给药途径是使用最为广泛，也是最容易被患者接受的一种给药途径，特别是对于慢性疾病的治疗，口服给药在患者顺应性方面大大优于其他给药途径。然而对于某些药物来说，如抗HIV药物，抗肿瘤药物等，由于本身性质（如水溶性低，因P-糖蛋白的外排作用导致的膜通透性差）以及胃肠道内各种吸收屏障导致口服吸收差，生物利用度低。因此，研究如何提高这类药物水溶性和膜通透性，有效克服胃肠道吸收屏障，是提高口服药物生物利用度的关键。 本课题以沙奎那韦（SQV）为模型药物，针对该药口服给药后水溶性差，膜通透性差的缺点，设计构建了两种新型纳米制剂：①纯药物纳米粒；②脂质膜修饰的纯药物纳米粒，研究其对沙奎那韦口服吸收的影响，并进行吸收机制的研究。首先将沙奎那韦原料药粉末采用反溶剂沉淀-高压均质法制备成纳米级别纯药物颗粒，以提高药物的溶解速度。然后在纳米晶体表面包被一层脂质膜制成一种核-壳形式的纳米载体，同时在载体表面修饰具有P-糖蛋白（P-gp）抑制作用的聚合物TPGS，克服上皮细胞屏障中P-gp对底物药物的外排。并在细胞水平研究两种药物纳米载体在胞内的转运过程。最后在动物水平研究纳米载体对于提高SQV口服吸收的作用。 本文第一部分对沙奎那韦纳米载体进行制备和表征。首先采用反溶剂沉淀-高压均质联用的方法制备了沙奎那韦纳米级纯药物颗粒，然后采用薄膜水化法制备了脂质膜包裹纯药纳米粒的核壳载体。所得晶态纯药纳米粒（Crystal pure nanodrug，CPN）粒径为（205.93±3.74） nm，无定型纯药纳米粒（amorphous pure nanodrug，APN）粒径为（191.30±5.18）nm，脂质核壳纳米载体粒径为（241.40±15.23）nm，其粒径分布均较为均一。电镜下可见不同的高分子材料作稳定剂制备的纯药纳米粒具有不同的形态：以PSS为稳定剂时，纯药纳米粒呈长条形棒状结晶，而以TPGS为稳定剂时纯药纳米粒呈不规则块状。X-射线粉末衍射及差示量热扫描结果显示SQV原料药粗晶（SQV coarse crystals）及CPN呈晶态且二者晶型一致；而APN则呈无定型。在APN外面包裹一层脂质膜后（Lipo@APN），在电镜和激光扫描共聚焦显微镜下观察呈明显核壳结构，即膜状结构覆盖于纯药纳米粒表面，表面变得较光滑。体外释放实验显示，两组纯药纳米粒CPN和APN在pH6.8的磷酸缓冲液释放介质中释放明显快于SQV coarse crystals组，十分钟累积溶解即达50％，粗晶体只溶解了15%。而将APN脂质膜包裹后药物释放速度明显变慢，8小时累积释放量不到20%。以上结果表明，将原料药粗晶体制备成晶态纯药纳米粒或无定形纯药纳米粒后药物的溶解速度得到明显改善。 第二部分，以Caco-2细胞作为细胞模型，对载体进行细胞水平研究。采用激光共聚焦显微镜、流式细胞仪对荧光标记的各制剂的细胞摄取进行定性和定量研究。结果显示，Lipo@APN载体的胞内荧光强度明显高于 CPN，APN和 coarse crystals组，表明 Caco-2细胞对Lipo@APN的摄取显著高于其它制剂组（P<0.05）。以培养21天后的Caco-2细胞单层膜为模型，考察药物的跨膜转运能力。经计算， SQVcoarse crystals、CPN、APN和Lipo@APN组制剂Papp值分别为，（2.25±0.44）×10-6、（4.87±0.43）×10-6、（5.05±0.82）×10-6和（8.13±0.96）×10-6 cm/sec。Lipo@APN组Papp值约为SQV coarse crystals组的3.61倍，跨膜转运量显著提高（P<0.05）。通过维拉帕米抑制细胞单层膜上的药物外排泵P-gp后，SQV coarse crystals，CPN，APN组跨膜转运量提高，而 Lipo@APN组跨膜转运量变化不大（ P＞0.05），说明Lipo@APN不被P-gp外排。载体转胞吞抑制结果显示，细胞膜上脂筏被抑制后，Lipo@APN跨膜转运量明显降低（P<0.01），说明其是通过脂筏介导的方式完成转胞吞过程。载体胞内转移途径研究结果显示，荧光标记的Lipo@APN能与内质网和高尔基体很好的共定位，而与溶酶体共定位较少，说明Lipo@APN进入细胞后主要经内质网和高尔基体途径转运。 第三部分，以雄性SD大鼠为动物模型，对药物吸收机制及药物动力学进行评价。对大鼠灌胃给药荧光标记各组制剂，1小时后取出各肠段进行切片，在激光扫描共聚焦显微镜下观察各制剂组在肠组织中的吸收分布情况。结果显示，Lipo@APN纳米载体在肠组织中荧光强度最强，且进入了肠组织粘膜固有层中。为了进一步研究纳米粒在整个肠段的转移情况，将取出的消化道在活体成像仪下观察荧光分布。结果显示，口服给药30min后，观察到四种制剂大部分位于胃和十二指肠内；1.5小时后，部分制剂仍在胃内滞留，而一部分到达空肠的中下部；3小时后，大部分制剂已经经胃排空，分布在整个小肠，结果显示四种制剂的胃排空和小肠运输速率没有明显的区别。然而，从整个消化道的荧光强度随时间变化来看，与其余制剂组在同一时间点相比Lipo@APN荧光强度变得更弱，而其余组在小肠上部仍可观察到较强荧光存在。结果表明尽管四种制剂的胃和小肠排空速度没什么区别，但Lipo@APN的吸收更快。药动学研究显示，Lipo@APN载体组血药达峰浓度为SQV原料药粗晶组血药峰浓度的8.82倍，四组制剂药-时曲线下面积(AUC)关系为：AUCLipo@APN>AUCAPN>AUCCPN>AUCcoarse crystals。此结果有力说明Lipo@APN纳米载体能有效提高SQV的吸收入血量，提高其口服生物利用度。