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本研究报告主要包括三个方面:小球藻生长因子提取方法的确定、CGF活性的研究及活性物质跟踪手段的确定、CGF中活性物质的初步分离纯化。首先利用免疫活性、抗氧化活性等指标,比较高压水提法、超声法、酶解法、韩士群专利法制备的CGF,发现:高压水提法的产率虽然低于酶解法,但其CGF能够极显著地促进Ana-1、RAW264.7细胞的生长,同时也能促进Ana-1吞噬中性红,吞噬率达到210.5%,还能显著地清除OH-,清除率为80%。最终确定高压水提法为小球藻生长因子的最佳提取方法。其次发现CGF在100μg/mL时与Ana-1共同培养24h后,可以显著地促进细胞吞噬中性红,吞噬率为213.5%,还能够显著地抑制LPS诱导细胞释放NO的量。CGF的浓度为75μg/mL,24h可以使Ana-1细胞增殖52.3%;200μg/mL的CGF与HEK-293细胞共同培养48h,可以使细胞增殖310%,并呈量效关系;CGF对Hela、HepG2细胞的促增殖活性与时间呈负相关关系,400μg/mL的CGF与细胞培养72h时的促增殖活性与24h相比下降了50%、66.9%;CGF均能促进大肠杆菌、乳酸菌细胞的增殖,并且促增殖活性呈现浓度依赖关系。然后将CGF用丙酮、乙醇分别分离,发现分离得到的沉淀对Ana-1细胞的增殖活性高于上清,同时乙醇沉淀的活性也高于丙酮沉淀的,增殖活性为59.2%;其次用无水乙醇将CGF分离成粗蛋白、粗多糖等组分,发现粗蛋白对Ana-1细胞的增殖活性显著地高于其他组分,增殖活性为55.7%;胰酶酶解CGF、粗蛋白后的组分的促增殖活性明显降低,从而认为粗蛋白是CGF的主要活性物质。最后研究发现粗蛋白能够显著地促进RAW264.7、HEK-293细胞的生长,增殖活性分别为66.9%、401.6%。高浓度的粗蛋白会引起Hela、HepG2细胞发生皱缩、脱壁、裂解、死亡现象,同时还会引起Hela细胞的DNA损伤,且损伤程度呈剂量、时间依赖关系。