丹参复方多糖颗粒剂与松塔色素的制备及其抗氧化活性研究

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本课题对丹参复方多糖的体外抗氧化活性以及其制剂、分析方法等进行了系列研究工作,对来自废弃资源的红松松塔的色素提取物的抗氧化活性也进行了研究,主要内容如下:1、对丹参复方总多糖的抗氧化活性进行研究,并对其脱蛋白脱色纯化前后的活性进行对照测定。采用水提醇沉法制备丹参复方总多糖,并对得到的总多糖进行脱蛋白、脱色等不同方法的纯化,测定各多糖产物清除羟基自由基、DPPH·自由基及超氧阴离子自由基的能力。由实验结果可知,丹参复方总多糖样品呈现明显的体外抗氧化活性,多糖活性随其浓度增大而增强;总多糖经脱蛋白、脱色等纯化步骤后体外抗氧化活性增强,纯化后的丹参复方总多糖仍然呈现明显的量效关系。体内脂质过氧化是诸多疾病的常见原因之一,天然成分的抗氧化活性常与抗肿瘤活性有一定关联,并与许多疾病的防治相关,丹参复方多糖的抗氧化活性值得继续深入研究和开发利用。2、建立了丹参复方多糖颗粒剂中多糖含量测定的新方法--淀粉酶法联合DNS法进行测定,有效克服了辅料淀粉干扰有效成分多糖含量测定这一技术难点,文献中尚未见有同类工作报道。在应用DNS法(3,5-二硝基水杨酸法)对丹参复方多糖颗粒剂中有效成分多糖进行含量测定时曾发现,因辅料淀粉也为多糖成分对含量测定形成干扰,导致DNS法不能测得有效成分多糖含量,只能获知有效成分多糖和辅料淀粉含量之和,文献中未见相应解决办法。本实验中尝试了下述思路:首先采用淀粉酶法除去颗粒剂中的辅料淀粉,将淀粉酶解为小分子双糖后,再利用它和多糖的醇溶性不同,以醇沉法分离出丹参复方多糖,此后即可使用DNS法对该多糖进行含量测定,避免辅料淀粉的干扰;由实验结果可知,所建立的淀粉酶法和DNS法联合测定丹参复方多糖颗粒剂多糖含量的方法,成功克服了辅料淀粉的干扰,方法学考察各项指标均符合规定,该方法可用于丹参复方多糖颗粒剂的多糖含量测定,对于含有辅料淀粉的其它中药制剂的多糖含量测定也可提供参考。3、在活性研究基础上,又进一步研究了丹参复方多糖颗粒剂的制剂工艺及质量检查。在制剂工艺研究中,通过比较试验,分别对颗粒剂的吸湿性、流动性及成型性等指标进行了考察,优选出颗粒剂的辅料种类及原料和辅料的配比。以含水乙醇为润湿剂进行制粒,干燥,整粒,即得丹参复方多糖颗粒剂。该实验结果可为丹参复方多糖制剂的后续研发提供参考。4、除上述丹参复方多糖系列研究之外,还对废弃资源松塔的色素提取物的初步分离和体外抗氧化活性进行研究,测定各色素产物的还原能力、清除·OH自由基、O2-·自由基能力。实验结果表明,色素粗提物和经阴离子交换树脂纯化得到的NaCl洗脱物均有明显的体外抗氧化活性。该NaCl洗脱物再经pH梯度萃取所得各组分也进行抗氧化活性测定,其中5%NaHCO3 5%Na2CO3萃取组分活性较强,5%NaOH萃取组分活性低于上述两萃取物。已知5%NaHCO3、5%Na2CO3萃取物的酸性高于5%NaOH萃取物的酸性,因而该实验中酸性较强的组分抗氧化活性也较强。离子交换树脂纯化所得盐酸-乙醇不同洗脱物的抗氧化活性实验结果表明,两种后被洗脱的组分3号和2号活性相近,最先洗脱的1号洗脱物活性低于上述两组分。即该实验中对阴离子树脂吸附强的组分,抗氧化活性也相对较强。由上述可知,本课题中研究确认了丹参复方多糖的体外抗氧化活性,经脱蛋白脱色纯化后其活性明显增强,研究了丹参复方多糖颗粒剂的制备,成功建立了丹参复方多糖颗粒剂中有效成分多糖含量测定的方法,有效克服了辅料淀粉干扰含量测定的技术难点,为丹参复方多糖的开发应用提供了活性、制剂、分析方法等系列参考数据,此外,还对松塔色素提取物进行了体外抗氧化活性,多种色素组分均呈现良好的活性,红松松塔这一昔日废弃资源的深入开发利用值得关注。以上工作尚未见有文献报道,期望能为同类研究提供参考。
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