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血吸虫病是世界上分布最广泛的寄生虫病之一,严重危害着广大疫区人民的身体健康。用于血吸虫病的诊断方法已有较多报道,但尚远不能满足当前血吸虫病防治工作的需要,它们均存在一些不同程度的问题,如灵敏度低、需要高素质的专业人员、操作繁琐费时、需用大型贵重的仪器、漏检和误检等。研究高灵敏度、简便、快速、可靠的血吸虫病诊断方法是很有价值的工作。 安培分析电化学免疫传感器是一种耦联电化学分析技术和传统的酶联免疫技术的高灵敏度传感装置,与其它电化学免疫传感技术相比,更加灵敏、快速,而且装置便宜,操作简单,易数字化,能方便地实现实时输出和监测。影响免疫传感器实际应用的最大障碍是可重复使用性,可更新的安培分析免疫传感器为解决这一难题提供了一种可能的途径。将抗原(抗体)与石墨或者碳固定在载体材料中,在一个竞争性的或者夹心式的免疫反应后,将酶标抗原(抗体)键合在传感器表面,通过一个酶催化反应来确定待测抗原(抗体)的浓度。传感器在一次免疫分析后,经过一个简单的抛光就可得到一个新的免疫组分层用于下一次免疫分析。方法较传统的ELISA和放射性免疫分析(RIA)简单、快速,可望作为一种临床诊断分析的工具。本论文结合一些新的固定材料,设计一种新的安培分析电化学免疫传感器,提出几种用于日本血吸虫病等诊断的安培分析电化学免疫传感器。同时我们也研究了DNA与一些传感载体相互作用的模式。席夫碱化合物可以作为许多阴离子电位型传感器的载体,同时也是一类具有抗癌活性的化合物,在氧化物存在的条件下,能损伤或者断裂DNA,与金属离子结合以后,其抗癌效果增强。在本论文中,我们采用荧光光谱法研究了一些席夫碱类金属配合物传感载体与DNA的相互作用,对其相互作用模式作了详细的探讨,筛选出二种与DNA有强烈相互作用的化合物。湖南大学分析化学专业博士学位论文 刘国东2001年4月 本论文具体内容包括以下几个方面: 第一部分:以固体石蜡作为载体材料,制备了一种可重复使用的安培分析电化学免疫传感器。生物组分在室温下快速制备且无【的孵化,在生物组分中加入一定量的牛血清白蛋白使免疫电极的4po异性吸附降低到一个很低的水平。以辣根过氧化物酶作为标记物,邻宴隍励作为酶催化反应的底物,采用一个竞争性免疫分析来确定待测抗原(或抗体)的浓度。门)在第一章中报道了制备可重复棚的日本血鹏电账免疫传感器,在036叶 毗滩范围内对日本血吸虫抗体进行了定量检测,并且发现该传感器可很好地区分血吸虫病阴性、阳性以及定量判定感染程度。$幡的日本血吸虫电化学免疫传感器至少可用于100次日本血吸虫抗体免疫分析。(2)在第二章和第三章中分别报道了研制可重复使用的转箔免蛋白免疫传雇泪影印补体3免墟奸劫鼓器,可以对人血清中浓度为236-刀D nglnL范围内的敞蛋白和鹏为 1.17-2925 UgrnL范围内的补雌三成分进行定量测量。(3)在第四章中,采用溶胶描掖技术,在低温下将补体第三成分抗血清固定在生物组分中。制备了可重复硼的补体3…墨安培分析兔疫传感器,bTyttAlliti#中浓度为 1.1735.lugtnL‘范围内的补体第三成分进行定g量。结果与临床诊断用的B正沈方法相比较,令人满意。所有这些工作,对于开发新型兔疫传感器在临床诊断中的实际应用,都具有4BI要的意义。 第二部分:在第五章和第六章中,合成了几种金属sdbl和水溶性的金属-席夫碱配合物传荫体,从荧光光谱、吸收艄、洲值、盐晌、雕效应、D狩灭与EB的竟争中u睑合实验等方面研究了它们与DNA的键合特性,表明它们与DNA6{IWH方式为嵌人式,同时0的金属配合物中,Offianl与水溶性的M卜席夫碱配合物与DNA的相互作用最强烈,求出了其固有键合常数0为 5.76xld d·L4、831Xlot IIxxL4,键合位点数分别为 OM和 0&4, DNA在IDxl炉d.V到5DX10“rlxiLL4和3Dxl炉IIXILL4到Zxl矿IIxxL4之间具有良好的线性关系,检出限分别为 4sl矿dL4和 7A XI矿dV。这些研究对于新型抗癌药物的设计和肿瘤的化学治疗有指导意义,同时,对于建立简便而有效的抗癌药物筛选方法也 良有帮助的。 在第七章中,利用循环伏安u备了0大知门聚合膜修饰电极,研究了C卜&lerl在溶液中和修饰膜上的电化学性质,发现OAsalal修饰电极对抗坏血酸具有明显的催化作用,其氧化峰电位从 p mV e到 180 mV,氧化峰电流明显升 -Ill- 卜 拍要高。在 ZDel炉 IYiLL4到 1.e 10“d·V浓度范围内可对抗坏血酸进行定量测量,利用制得的修饰电g定了新鲜果汁中抗坏血酸的含量,结果与药典法吻合。 在第八章中,对金属sdlerl聚合膜修饰电极作为碘离子电位型传感器进行了探讨,其中钻毛