酶是活细胞内产生的具有高度专一性和催化效率的蛋白质，生物体在新陈代谢中，几乎所有的化学反应都是在酶的催化下进行的，酶是生命活动必不可少的物质，人体一旦缺失酶会导致多种遗传疾病。因此，酶活性的测定在临床医学上具有十分重要的现实意义。近年来，生物传感器以其特异性强、分析速度快、操作简单、成本低等优点而广泛应用于生物医学、食品、化学、环境监测和医药等领域。因此，本论文以腺苷脱氨酶、尿嘧啶DNA糖基化酶和T4多聚核苷激酶为检测对象，发展了一系列新型的生物传感技术。具体内容包括：腺苷脱氨酶（ADA）是一种重要的核酸代谢酶，其表达含量是临床上一些重大疾病的诊断指标之一。第2章中，我们首次开发了一种基于酶调控非标记纳米金团聚的策略用于ADA的比色检测。该方法主要依赖于腺苷的环外氨基与纳米金形成强烈的相互作用，从而将纳米金表面的柠檬酸根离子置换下来，导致纳米金团聚，纳米金溶液颜色由红色变为紫色。而ADA对腺苷进行脱氨基作用后，生成的次黄苷不能与纳米金表面形成相互作用，从而不会引起纳米金团聚，纳米金溶液仍为红色。因此，通过纳米金溶液颜色的变化即可实现对ADA的可视化检测。该方法操作简单、响应快速，并且具有较高的灵敏度，其检测下限为0.8227U/L。此外，我们利用该方法成功实现了对其抑制剂的测定。作为一种重要的碱基切除修复酶，尿嘧啶DNA糖基化酶（UDG）在DNA损伤修复上发挥着重要作用。第3章中，我们开发了一种结合酶放大的电化学传感平台用于UDG活性及其抑制剂的简单灵敏检测。该测定方法依赖于UDG作用后双链UDG底物的熔链温度降低，从而导致生物素化的信号探针从电极表面脱离。信号探针上标记的生物素用作示踪物，碱性磷酸酯酶标记的链霉亲和素（SA-ALP）用作报告分子。标记生物素的信号探针的失去导致电极表面结合的SA-ALP数量减少，因此造成产生的电信号减小。该测定方法简单、成本低廉、选择性好，具有较宽的响应范围（0.01-10U/mL）和较低的检测下限（0.0079U/mL）。该方法不仅提供了一种通用的碱基切除修复酶的测定方法，而且还在药物筛选上显示出了潜在的应用价值。T4多聚核苷激酶（T4PNK）对DNA的5′羟基磷酸化修饰在DNA断裂修复上发挥着重要作用。第4章中，我们建立了一种目标激活自催化DNA酶放大的策略用于T4PNK的测定。首先我们用T4PNK将一段E6DNA酶的互补序列的5′羟基末端磷酸化，磷酸化后的序列与E6DNA酶杂交使DNA酶活性被抑制，加入λ核酸外切酶（λexo）后，5′磷酸化的互补序列被降解，E6DNA酶游离出来激活自催化信号放大过程。而当不存在T4PNK时，互补序列不能被磷酸化，从而导致后续λexo降解和DNA酶的自催化放大过程都无法进行。该方法利用E6DNA酶的自催化信号放大过程，实现了对T4PNK的灵敏检测。