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目的:研究宫颈粘膜细胞因子在宫颈高危型人乳头瘤病毒(High-risk human papillomavirus,HR-HPV)持续感染及宫颈病变进展过程中的作用,并分析感染不同型别HR-HPV宫颈粘膜的免疫反应。筛选在一过性HR-HPV感染与持续HR-HPV感染之间及低级别鳞状上皮内瘤变(low grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)与高级别鳞状上皮内瘤变(high grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)之间有差异性表达、可能发挥免疫作用的细胞因子,探讨引起HR-HPV持续性感染及不同程度宫颈病变可能的免疫原理。进而为区分HR-HPV感染状态及不同宫颈病变程度提供新的免疫标记物,为预防HR-HPV持续感染及宫颈病变进展提供免疫学基础。方法:2015年12月至2016年5月于天津市中心妇产科医院阴道镜门诊选取本研究的研究对象,根据HC-II结果筛选入组研究对象150名,其中148名患者具有TCT检测结果,所有患者均进行阴道镜检查及宫颈活组织检查。所有研究对象均已签署知情同意书,于阴道镜门诊就诊时收集患者的阴道灌洗液(Cervical vaginal lavage,CVL)及宫颈脱落细胞。提取宫颈脱落细胞基因组DNA,应用巢式PCR及其PCR产物经焦磷酸测序(Pyrosequencing)技术对15种HR-HPV(HPV16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,66,68,69)进行分型。应用多重微球芯片技术检测CVL中9种细胞因子(IL-1β、IL-2、IL-4、IL-8、IL-10、IL-12、IL-21、TNF-α及IFN-γ)的表达情况,以分析宫颈粘膜免疫状态。应用SPSS.23软件对数据资料进行方差分析(Analysis of variance,ANOVA)及危险相关性的分析。从HPV-DNA、细胞学及组织学水平分别进行细胞因子表达水平与不同HPV感染状态、不同HPV核酸载量、不同HR-HPV型别、不同细胞学结果及不同宫颈组织病理结果之间的关系。结果:1.在114例HR-HPV感染者中,94(82.46%)例为单型别HR-HPV感染,其中37(39.4%)例为HPV16型别感染;20(17.54%)例为多型别混合感染,其中16(80%)例为HPV16与其他类型HPV混合感染,混合感染HPV型别为HPV18,31,52,56,58。2.在无病变组、LSIL及HSIL组中,HPV16的感染率分别为20%,30%,47%;HPV18的感染率分别为26.7%,22.5%,22.4%;其他型别HR-HPV的感染率分别为53.3%,47.5%,30.6%。在本研究中,HPV16是引起宫颈病变的主要型别。3.于HPV16及HPV18型别中,IL-8的表达水平明显高于其他细胞因子(P值均小于0.05),在HPV31、HPV33、HPV39、HPV52、HPV56及HPV58型别中,各种因子的表达水平之间均无显著统计学差异(P>0.05)。4.在36例HR-HPV一过性感染者及40例HR-HPV持续性感染者两组间,IL-1β的表达差异有显著性(P=0.041),其表达水平在持续感染组中高于一过性感染组,但此差异性表达与HR-HPV感染状态无明显相关性(r=0.136,P=0.327)。5.在36例LSIL与38例HSIL两组间,IL-1β、IL-10、IL-21及TNF-α的表达差异有显著性(P值分别为0.01、0.008、0.046及0.019),其表达水平在HSIL中明显高于LSIL,且IL-1β及TNF-α的表达水平与宫颈病变程度呈正相关(r=0.474,P=0.001;r=0.433,P=0.015)。6.与淋巴细胞调节因子(IL-2、IL-4、IL-21)及免疫炎症调节因子(IL-10、IL-12、IFN-γ)相比较,促炎因子(IL-1β、IL-8、TNF-α)在四组(HPV一过性感染及持续性感染组、LSIL及HSIL)中的表达水平均明显高于其他两类细胞因子(P值均小于0.001)。结论:1.HR-HPV感染者大部分为单纯感染,其中HPV16为最常见感染型别,HPV 18次之;随着宫颈病变的发生发展,HPV16的感染率随之上升,HPV 18的感染率较平稳,其他型别HR-HPV感染率随之下降。2.与其他HR-HPV型别相比,HPV16及HPV18感染宫颈后可引起不同的宫颈粘膜免疫状态,高水平的IL-8可能有利于其诱发宫颈病变的发生。3.IL-1β可能为HR-HPV的持续感染提供有利的宫颈粘膜免疫微环境。4.IL-1β、IL-10、IL-21及TNF-α的高水平表达不利于LSIL的逆转,可为宫颈病变程度的增加提供有利的免疫条件,且IL-1β与TNF-α的表达水平与宫颈病变程度的增加呈正相关。5.促炎因子(IL-1β、IL-8、TNF-α)在宫颈HR-HPV感染及宫颈病变发展过程中占有重要地位。