【摘 要】
：
目的：构建改良型TAT-VP3融合基因的原核表达载体,表达目的蛋白。成功表达后,对其进行纯化,并对纯化的目的蛋白进行鉴定,切除GST标签,得到凋亡素蛋白。方法：采用PCR法设计和扩增改良型TAT-VP3融合基因,克隆至表达载体,构建改良型TAT-VP3融合基因的原核表达载体,转化大肠杆菌BL21（DE3）plyS,经IPTG诱导表达,15%SDS-PAGE鉴定。利用IPTG温控诱导改良型TAT-V
论文部分内容阅读
目的：构建改良型TAT-VP3融合基因的原核表达载体,表达目的蛋白。成功表达后,对其进行纯化,并对纯化的目的蛋白进行鉴定,切除GST标签,得到凋亡素蛋白。方法：采用PCR法设计和扩增改良型TAT-VP3融合基因,克隆至表达载体,构建改良型TAT-VP3融合基因的原核表达载体,转化大肠杆菌BL21（DE3）plyS,经IPTG诱导表达,15%SDS-PAGE鉴定。利用IPTG温控诱导改良型TAT-VP3融合蛋白表达后,表达蛋白经GST亲和层析纯化,蛋白纯化产物进行SDS-PAGE和Western bolt鉴定,并利用Prescission蛋白酶将GST标签从纯化的融合蛋白上切除。结果：成功构建了改良型TAT-VP3融合基因的原核表达载体,经酶切、测序鉴定,证明载体构建正确。改良型TAT-VP3融合蛋白经温控诱导后得到稳定表达,经SDS-PAGE鉴定可见相对分子质量42000的特异性目的条带,经GST亲和层析纯化后,得到了纯度较高的改良型TAT-VP3融合蛋白。Western bolt验证了表达蛋白的特异性。利用Prescission蛋白酶将纯化的融合蛋白进行GST标签切除,得到了凋亡素蛋白。结论：成功构建改良型TAT-VP3融合基因原核表达载体,表达目的蛋白。并纯化出改良型TAT-VP3融合蛋白,将GST标签切除后,最终得到了凋亡素蛋白,为进一步研究其免疫原性和抗肿瘤活性奠定了基础。
其他文献
随着中国经济的快速发展和人民生活质量的提升，针对机场在许多方面仍然面临着问题，特别是机场服务质量问题。通过构建基于SERVQUAL量表的机场服务质量评价指标体系，进行问卷设计和数据采集，对数据样本进行可信度分析以及SERVQUAL量表的统计分析，提出针对机场服务质量的改善措施。
【目的】观察下气汤对中晚期非小细胞肺癌癌因性疲乏（CRF）的防治作用和安全性。【方法】将60例中晚期非小细胞肺癌患者随机分为试验组和对照组，每组各30例。2组患者均按期正常化疗，对照组于化疗当天开始给予止呕、护肝、护胃治疗，以减轻及预防化疗副反应；试验组在对照组用药的基础上加用下气汤颗粒剂口服治疗，2组患者均连续治疗1个化疗周期（21 d）。观察2组患者治疗前后简易疲乏量表中文版（BFI-C）评分
目的 浅析下腔静脉滤器（IVCF）植入预防肺动脉栓塞（PE）的观察与护理体会。方法 纳入本单位于2015年1月至2020年7月间收治的150例急性下肢深静脉血栓（DVT）形成患者作为研究样本，治疗前下腔静脉滤器植入，总结护理要点。结果 150例患者手术均获得成功，无1例患者出现并发症，术后定期复查了解滤器与肺部情况，随访20个月，未出现1例肺动脉栓塞发生情况，138例患者患肢肿胀表现完全消退，其他
近年来，人们逐渐意识到美术史论对提升中国美术作品的重要性，纷纷加入到美术史论的研究之中。目前，美术史论研究已然成为研究领域颇受瞩目的科目，但中国目前美术史论研究就内容而言，与西方美术史论研究之间存在一定差距，如研究习惯、研究方法、研究内容等方面，再加上中国历史文化亘古流传，美术文化早在古代就已经被人们所认知，形成了自己独特的见解和体系。本文以中国美术史论研究状况作为切入点，进一步研究当今美术
百年来中国共产党国际形象是在党的奋斗实践中生成、淬炼和塑造出来的,它因党而立、因党而兴、因党而强,始终同党和人民的事业紧密相连。中国共产党国际形象建设蕴含着主体自塑与客体他塑的统一、国家利益与全球利益的平衡和国家实力与国际权利的协调三重内在逻辑。在不断提升党的国际知名度、国际影响力、国际话语权的历史发展进程中,积淀了无私为民的执政者、胸怀天下的奋斗者和全球治理的引领者等大党国际形象建设经验。新时代
目的：评价雷公藤红素对非小细胞肺癌NCI-H1299细胞的迁移与侵袭作用，并探讨其初步的作用机制。方法：采用CCK-8实验评价雷公藤红素对NCI-H1299细胞增殖活性的影响，获得非毒剂量；采用伤口愈合实验和Transwell迁移实验观察雷公藤红素对NCI-H1299细胞迁移能力的影响；采用Transwell侵袭实验检测雷公藤红素对NCI-H1299细胞侵袭能力的影响；蛋白免疫印迹实验与实时荧光定
《给教师的建议》,苏霍姆林斯基,这本书,这位作者,相信是每一个身为教师的人所熟知的。书中讲了些什么,大家也都有所了解。喜好钻研的人,还反反复复地研究其中的奥秘。而我,已记不清第一次读这本书是什么时候。但第一次读这本书时,心潮澎湃的感觉,依然还在心头翻涌。这本书在书架上一待就是十几年。重新翻开,当年零零星星的笔记似乎还带着手的余温。
通过查阅历代本草文献,对当归的功效主治和用药禁忌进行考证,归纳总结出其功效有31条,主治病证有52条,包括了内、外、妇、儿4个方面。除《中华人民共和国药典》中所提到的功效主治外,当归尚有止咳止呕、止血止汗、明目养心、滋肝润木、安胎催产、排脓生肌等功效,可治疗咳逆上气、温疟寒热、中风挛蜷、多种疼痛和出血、冲脉为病、带脉为病以及漏下绝子、经闭淋沥、痈疽、寒疝等病证。当归用药禁忌包括了配伍禁忌、证候禁忌
图像学起源于西方艺术史研究领域,是主要研究绘画主题与传统意义和其他文化发展之间联系的一门学科。在20世纪初,我国著名作家王国维就清楚地认识到了世界与民族的关系。他指出,在学术研究过程中"未有西学不兴,而中学能兴者;亦未有中学不兴,而西学能兴者"。随着我国整体经济的发展与国际地位的不断提升,国际上的学者开始全面关注我国的美术史。对中国美术史的研究还处于初级阶段,怎样借鉴西方艺术史研究方法和理论