多囊卵巢综合征（Polycystic Ovary Syndrome,PCOS）是一种复杂的多病因疾病,涉及多种代谢障碍,包括糖代谢缺陷和胰岛素抵抗。相关代谢紊乱引起的代谢物改变可能影响卵巢卵泡发育,直观体现在卵泡液中类固醇激素的代谢异常。目前高雄激素血症作为PCOS临床诊断的生化指标,在PCOS诊疗过程中并不充分,因此临床补充了雌二醇（Estradiol,E2）及孕酮（Progesterone,P4）作为辅助指标,但是E2/P4指标的有效性有待评估,且亟需探索更有效的临床指标。本课题在前期文献调研的基础上进行Meta分析,从PCOS的发病机理和辩证法的有效治疗方案深入挖掘新的突破性标志物来减少诊疗盲点,根据分析结果我们提出了以联合E2、P4、17-羟孕酮（17-hydroxyprogesterone,17-OHP4）、11-脱氧皮质酮（11-deoxycorticosterone,DOC）及孕烯醇酮（Pregnenolone,P5）五种类固醇作为PCOS新的临床诊断指标,并评估了该指标的有效性。首先,鉴于目前类固醇分析方法的多样化,以及对于痕量类固醇分析的局限性,我们建立了一种无需衍生化能同时定量不孕症卵泡液中五种类固醇激素的高灵敏度的UPLC-MS/MS方法,并应用于临床样本检测。验证分析了在所研究的五种类固醇激素的内源性浓度范围内,该方法显示出良好的线性关系（R2>0.99）;方法的日间/日内精密度、准确性、稳定性均符合生物样品的分析要求;与临床上E2和P4的免疫检测结果相比,该方法仍显示出极高的一致性和更高的效率、灵敏度。其次,对健康对照组、不孕症组、PCOS组卵泡液中五种类固醇水平进行UPLC-MS/MS分析测定,采用多因素逻辑回归分析（Multiple Logistic Regression analysis）和经典风险比（Odds ratio,OR）进行相关性分析,结果显示:卵泡液中DOC、E2水平均与PCOS发生风险存在正相关,17-OHP4、P5、P4水平均与PCOS发生风险存在负相关。最后,采用ROC曲线（Receiver Operating Characteristic curve）评估以联合五种类固醇为诊断指标识别PCOS的能力,并与临床纳入的E2/P4指标对比,结果显示:五种类固醇识别PCOS的能力较高且更具有统计学意义。研究结果表明,卵泡液中E2、P4、17-OHP4、DOC及P5的激素水平与PCOS发生风险具有相关性,且PCOS临床诊断中以联合五种类固醇为诊断指标的有效性优于E2/P4指标。