小蓟Cephalanoplos segetum（Bge.） Kitam俗称刺儿菜、野红花、青青菜,为菊科植物,在我国分布广泛,资源丰富。它具有凉血止血,祛瘀消肿的功能,为传统的中药。小蓟同时也可以食用,作为药食两用的野生植物资源含有丰富的营养物质,为人们喜爱的民间野菜。多糖具有丰富的药理活性,且无毒副作用,已广泛应用于临床及保健品市场。为了进一步开发利用小蓟资源,本试验对小蓟多糖的提取分离、组成结构及其生物活性进行了研究。 本实验以陕西周至的小蓟干料为原料,进行了小蓟营养成分的测定;小蓟多糖的最佳提取工艺、分离纯化及对所得组分进行了纯度鉴定、分子量测定和组成分析;采用H₂O₂/Fe²⁺体系和Fe²⁺诱发卵黄脂蛋白PUFA过氧化体系研究小蓟多糖半纯品的体外抗氧化活性;通过动物实验进行了小蓟粗多糖生物学作用研究。通过以上研究,为综合开发利用小蓟资源提供参考和依据。 主要实验结果如下: 1.小蓟中灰分含量为8.760%、粗蛋白质含量为4.470%粗脂肪含量为0.430%。在已测定的17种氨基酸中,氨基酸总含量为10.302%,其中人体必需的氨基酸有7种,占氨基酸总含量的42.526%。在已测定的15种矿物元素中,含有9种人体必需元素,其中Ca、Mg的含量较高;有害元素Hg、As、Pb及Cd的含量较低。 2.热水浸提小蓟多糖的最佳工艺为:提取温度90℃,提取时间120min,料液比为1∶10。 3.超声波辅助提取小蓟多糖的最佳工艺参数为:功率250W,提取20min,料液比为1∶15。 4.木瓜蛋白酶+Sevag法为最佳脱蛋白方法,即可较完全的脱除粗多糖中的蛋白成分,又能大大降低多糖的损失率。蛋白脱除率达96.45%。 5.经过DEAE-52和Sephadex G-200柱层析分离到CSK-A’、CSK-B’、CSK-C’、CSK-D’四种多糖组分。 6.四种精制级分纯度鉴定:紫外光谱显示在260nm、280nm处均未发现核酸和蛋白质的吸收峰;醋酸薄膜电泳都得到单一色带;SephadexG-200柱洗脱后,四种多糖的洗脱峰基本均匀对称。 7.组成和结构分析:Sephadex G-200柱层析测定它们的分子量分别为20.7kD、28.6kD、148.0kD、501.2kD;气相色谱分析结果表明CSK-A’主要有木糖、半乳糖、葡萄糖组成,质量比为6.31∶8.52∶1.03,CSK-B’主要有鼠李糖、山梨糖和葡萄糖