Notch配体DLL4在肺炎支原体肺炎中的表达及意义

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目的:了解肺炎支原体肺炎(Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia,MPP)患儿外周血单个核细胞Notch配体DLL4的表达水平,探讨Notch信号通路在MPP发病中的作用。方法:选取2015年3月~2016年7月在苏州大学附属儿童医院呼吸科住院治疗的MPP患儿128例作为研究对象,其中轻症76例,重症52例,并选取同期外科择期手术35例患儿作为对照组,同时搜集患儿的临床及实验室检查资料并进行分析比较。采用荧光实时定量PCR(RT-PCR)检测外周血Notch配体Jagged1、Jagged2、DLL1及DLL4的表达水平并进行比较。采用流式细胞技术检测淋巴细胞亚群CD3+细胞、CD3+CD4+细胞、CD3+CD8+细胞及CD3-CD19+细胞等的表达水平。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血浆IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-17及IL-36α的水平。分析MPP组Notch配体DLL4与各临床指标、淋巴细胞亚群及血浆IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-17及IL-36α的相关性。结果:(1)MPP患儿均表现为发热、咳嗽等症状,但重症组较轻症组年龄大(5.50y vs 3.24y,P=0.000),热程长(6.72d vs 2.58d,P=0.000),住院时间长(8.56d vs 7.34d,P=0.027);重症MPP患儿白细胞计数、中性粒细胞百分比及C反应蛋白均明显高于轻症MPP(P=0.006,0.005和0.000);重症MPP患儿影像学以大叶性肺炎多见,且易合并胸腔积液,而轻症MPP患儿以小叶性肺炎多见。(2)MPP组外周血单个核细胞Notch配体DLL4表达水平显著高于对照组(P=0.000),而Jagged1、Jagged2和DLL1的表达在两组间差异无统计学意义(P均>0.05);重症MPP组外周血单个核细胞Notch配体DLL4表达水平显著高于轻症MPP组(P=0.034),而Jagged1、Jagged2和DLL1的表达在两组间差异无统计学意义(P均>0.05)。(3)MPP组外周血淋巴细胞亚群,CD3+细胞、CD3+CD4+细胞水平均低于对照组,CD3+CD8+细胞、CD3-CD19+细胞水平均高于对照组(P均<0.001);重症MPP组外周血淋巴细胞亚群,CD3+细胞、CD3+CD4+细胞水平低于轻症组(P=0.009和0.006),CD3+CD8+细胞、CD3-CD19+细胞水平高于轻症组(P=0.027和0.002)。(4)MPP组血浆IFN-γ、IL-17和IL-36α的水平均显著高于对照组(P均<0.001),而IL-4和IL-10的水平则低于对照组(P=0.003和0.002);重症MPP组患儿血浆IFN-γ、IL-17和IL-36α的表达高于轻症MPP组(P=0.000,0.011和0.000),而IL-4和IL-10在两组间的表达差异无统计学意义(P=0.955和0.810)。(5)MPP外周血单个核细胞中Notch配体DLL4表达水平与住院时间和白细胞计数呈正相关(r=0.232和0.183,P=0.008和0.039),与热程、中性粒细胞百分比、CRP、IgG、IgA和IgM无显著相关性(P均>0.05)。(6)MPP组外周血单个核细胞Notch配体DLL4表达水平与CD3+细胞、CD3+CD4+细胞表达呈负相关(r=-0.199和-0.276,P=0.024和0.002),与CD3+CD8+细胞呈正相关(r=0.277,P=0.002),与CD3-CD19+细胞无显著相关性(r=0.013,P=0.880)。(7)MPP组外周血单个核细胞Notch配体DLL4表达水平与血浆中IFN-γ、IL-17的水平呈正相关(r=0.176和0.194,P=0.047和0.028),与IL-4、IL-10和IL-36α的水平无显著相关性(r=0.027,-0.089和-0.127;P=0.766,0.320和0.154)。结论:MPP组患儿Notch配体DLL4呈高表达,病情越重表达水平越高。Notch配体DLL4的表达与CD3+细胞、CD3+CD4+细胞、CD3+CD8+细胞及血浆IFN-γ、IL-17有一定的相关性,提示Notch信号通路可能通过影响免疫细胞功能和调控Th1及Th17细胞的分化,在肺炎支原体感染后的免疫炎症机制中发挥重要作用,这进一步丰富了MPP的免疫学发病机制,为寻找新的治疗方案提供思路。
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