【摘 要】
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该文分为三章:第一章:亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒强弱毒株VP1基因的序列分析.采用一步法分别分离了亚洲Ⅰ型FMDV强弱毒株的RNA,利用RT-PCR的方法从中扩增了674bp的DNA片段.克隆目的
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该文分为三章:第一章:亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒强弱毒株VP1基因的序列分析.采用一步法分别分离了亚洲Ⅰ型FMDV强弱毒株的RNA,利用RT-PCR的方法从中扩增了674bp的DNA片段.克隆目的基因后,采用双脱氧DNA链末端终止法测得了其VP1基因36～633位的核苷酸序列.第二章：抗Asial型口蹄疫病毒的重组多肽疫苗免疫原性分析.据第一章研究结果推测Ⅰ型口蹄疫病毒（FMDV）VP1蛋白的133～158位氨基酸肽段可能是一重要的B细胞表位,而VP420～34位氨基酸肽段则是已知的重要的T细胞表位.第三章：抗Asial型口蹄疫病毒DNA疫苗重组载体构建及表达蛋白的免疫原性检测.采用真核偏爱密码子化学合成了VP1中编码133～158位氨基酸及VP4中编码20～34位氨基酸这两个抗原表位基因,将其组成133～158-20～34-133～158串联结构,在基5端加上鼠Igκ链信号肽序列,在翻译调节区上增强表达的Kozak序列,同时在133～158-20～34-133～158串联结构3端终止密码子下游加上CpG免疫刺激序列（CpG-ISS）,将这些片段连接后,克隆到真核表达载体pHook-2上,构建成功了DNA疫苗重组表达载体pAS1-E.用pAS1-E DNA 直接注射豚鼠体内表明,pAS1-E具有免疫原性.这为进一步研究最终用于防治口蹄疫疾病的DNA疫苗打下了重要基础.
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