板蓝根中表告依春的提取、纯化及工业化生产设计

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:h515295585
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目的:本文以板蓝根为研究对象,系统研究板蓝根中表告依春(Epigoitrin, EP)的提取、纯化工艺条件,在此基础上,对工艺进行中试放大研究、工业化生产参数的优化研究以及工业化生产设计研究。旨在“建立起准确、快速、灵敏的EP分析检测方法,对整个实验过程进行跟踪检测,指导各工艺参数的优化筛选;优选出板蓝根中EP的最佳提取和纯化工艺方法及参数条件;阐明EP分子印迹壳聚糖/凹土材料(Epigoitrin-Imprinting Chitosan/Attapulgite, EP-ICA)纯化EP的机制;优化出中试放大工艺条件;形成年产5吨(Ton,t)EP的工艺车间。方法:从选择板蓝根提取物和纯化物中EP的HPLC测定色谱条件入手,建立起适合于板蓝根提取物和纯化物中EP测定的HPLC法。随后,结合工业化生产中提取物及纯化物质量控制的实际,确定提取和纯化工艺条件的筛选指标。利用该指标,于小试规模条件下,对影响板蓝根中EP提取和纯化的相关参数进行研究,首先,采用正交实验设计,对板蓝根中EP提取的参数条件进行优选,得到最佳提取工艺参数条件,并以此为基础,得到板蓝根EP提取物;然后,利用EP-ICA对EP进行分离纯化,通过静态吸附解析实验和动态吸附解析实验,并采用单因素实验设计,对EP-ICA分离纯化EP的参数条件进行优选,得到最佳纯化参数条件,并以此为基础,得到EP产品。此外,实验还通过对EP-ICA分离纯化EP的动力学实验和热力学实验研究,阐明分离纯化机制。在此基础上,对分离纯化的相关工艺方法及参数条件进行中试放大和工业化生产设计,设计形成年产5t EP的工艺车间。结果:HPLC测定板蓝根提取物和纯化物中EP的色谱条件为:C18柱(250mm×4.6mm,5gm);流动相:甲醇-水(10:90,v/v);流速:1.0mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL;检测波长(λ):245nm;灵敏度:0.05AuFs;理论塔板数不低于6000。在该条件下测定板蓝根提取物中EP的线性范围为3.4-54.4μg/mL,平均加样回收率为101.1%,相对标准偏差为1.63%;板蓝根中EP提取、纯化的小试工艺路线为:板蓝根—粉碎—提取—过滤—浓缩—干燥—溶解—调pH—EP-ICA吸附分离—浓缩—喷雾干燥;板蓝根中EP小试提取的最佳工艺条件:料液比为1:20,提取次数为3次,提取溶剂为10%CaO溶液,提取时间为4.5h。在该工艺条件下,EP提取物的得率为8.84%,产品中EP含量为3.89%;EP-ICA分离纯化EP的小试最佳工艺条件是:样品EP起始浓度为1.05mg/mL,样品溶液的pH=5,吸附温度为35℃,上样流速为2.0BV/h,上样量为3.0BV,吸附床的径高比为1:5,解析液为氨水-乙醇-水(5:30:70),解析液流速为4.0BV/h,解析液用量为8BV。在该工艺条件下,EP-ICA的饱和吸附量为38.72mg/g,解析率为89.97%,产品中EP含量为90.74%,回收率为83.45%;EP-ICA对EP的吸附为单层吸附、自发进行、需热反应、是物理吸附占主导作用的熵推动过程,其吸附过程更符合拟二级动力学模型和Langmuir热力学模型;通过对小试工艺的修正和设备转换,板蓝根中EP提取、纯化的中试工艺路线为:板蓝根—粉碎—罐组式动态逆流提取—过滤—调整EP浓度和pH-EP-ICA吸附分离—浓缩—喷雾干燥。提取过程的最优中试参数条件为:板蓝根粉末比CaO为1:1.5,料液比(板蓝根粉末比去离子水)为1:15,提取时间为3.0h,提取罐组单元数为4;在中试的优化工艺和参数条件下,将投料量和分离柱直径分别增加100倍和10倍后,其提取率8.56%,提取物中EP含量为3.77%,均大于小试工艺的80%,表明提取工艺条件满足工艺放大的要求;纯化回收率为83.34%,产品纯度为90.06%,分别为小试纯化的99.25%和98.88%,表明,吸附床放大对产品纯度和回收率影响不明显;EP-ICA对EP的饱和吸附量为33.87mg/g,解析率为85.86%,均大于小试工艺的80%,表明,分离纯化工艺条件能满足工艺放大的要求;通过工艺流程设计、物料衡算、能量衡算、主设备选型、车间布置设计、劳动组织及岗位定员、劳动保障及安全生产、“三废”处理及综合利用等内容的设计,形成了年产5t90%EP的生产技术能力。结论:实验优化的工艺条件可行、可靠,能满足工业化生产要求,其实验结果可为板蓝根中EP提取和纯化的工业化生产提供参考。
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