在大田条件下,以西南地区主要油料作物——油菜（渝油28）为研究对象,研究了撒施（B）、沟施（F）、穴施（H）3种不同施肥方式与180kg/hm~2（N1）、144kg/hm~2（N2）、108kg/hm~2（N3）3种不同施氮量,对油菜生长发育、产量、植株与土壤养分、土壤酶和微生物功能多样性的影响,为油菜生产中改进施肥技术、提升肥料利用率提供参考。主要研究结果如下:（1）沟施和穴施氮肥能够促进油菜的生长。沟施和穴施对油菜全生育期株高均有促进作用,表现为沟施、穴施处理显著高于撒施处理。沟施和穴施可以显著提升油菜蕾薹期、花期茎粗,在N2水平下沟施、穴施处理优势格外明显。沟施和穴施氮肥可以显著提升N1、N2施氮水平下油菜功能叶数并且增长了叶长,增大油菜叶面积,有利于油菜光合作用的进行。在N3基础上增加施氮量显著提升了油菜全生育期株高,蕾薹期、花期、成熟期茎粗,有助于增加功能叶数和增大叶面积。（2）沟施和穴施氮肥可以改善油菜根系形态,促进根系生长。沟施和穴施显著提升了油菜苗期总根长、根系表面积、根尖数,蕾薹期总根长、根系表面积、根系总体积,以及花期根系总体积、总根长。在N3基础上增加施氮量有利于苗期、花期根尖数的增加,在苗期和蕾薹期促进了总根长、总表面积和根系总体积的提升。施氮量和施肥方式对成熟期根系生长无显著影响。（3）沟施和穴施氮肥有利于油菜干物质积累。沟施和穴施对苗期地上部的干物质积累有显著提升,在蕾薹期和花期显著增加了茎、叶的干物质积累。根系对施肥方式的改变响应不明显。在N3基础上增加施氮量苗期、蕾薹期地上部、地下部及整株干物质均显著提升,花期地上部、整株干物质积累显著提升,对成熟期干物质积累无显著影响。在N3基础上增加施氮量和沟施、穴施氮肥对每角粒数和千粒重无显著影响,但能显著提升单株角果数,从而提升油菜产量。另外,氮肥偏生产力沟施、穴施较撒施处理平均涨幅为9.12%和11.09%,表明沟施和穴施显著提升了油菜的氮肥偏生产力。（4）沟施和穴施氮肥显著提升了油菜籽粒中的油酸、黄籽度、含油量,且有助于降低硫苷和芥酸含量,提升品质。在N3基础上增加施氮量显著增加了籽粒蛋白质含量、降低了含油量、硫苷、黄籽度。在N3基础上增加施氮量及沟施和穴施氮肥均有助于油菜各器官的氮素积累。总体表现为N1>N2>N3,H>F>B。沟施和穴施可显著提升苗期、蕾薹期、花期茎、叶中的氮素积累,但对根影响不大。在成熟期,在N3基础上增加施氮量仅提升了籽粒中的氮素积累,对根、茎、角果皮影响不显著。（5）氮肥沟施和穴施对微生物多样性的影响利弊并存。各施肥方式对土壤微生物活性的影响表现不一。微生物恒温培养48h后N1、N3水平下的碳源利用强度为F>B>H,N2水平则沟施和穴施没有优势。在N3基础上增加施氮量有助于增强微生物对碳源的利用。穴施能显著提升Simpson指数（D）,却降低了均匀度指数（E）,沟施较撒施处理没有优势。在N3基础上增加施氮量有助于Shannon多样性指数（H）、均匀度指数（E）的提升,对丰富度指数（S）没有提升,降低了Simpson指数（D）。（6）在N3基础上增加施氮量和沟施、穴施氮肥能显著提升土壤养分。在N3基础上增加施氮量显著提升了土壤全钾、碱解氮含量,沟施和穴施显著提升了土壤全钾、有机质含量和土壤p H。沟施和穴施氮肥能提升土壤酶活性。在苗期、花期、成熟期,沟施和穴施氮肥显著提升了蛋白酶活性,在苗期、花期沟施和穴施氮肥显著增强了脲酶活性。苗期、蕾薹期蔗糖酶和全生育期淀粉酶在沟施和穴施处理下均有一定提升,但不显著。在N3基础上增加施氮量能显著提升油菜全生育期土壤蔗糖酶、淀粉酶活性,苗期、蕾薹期、成熟期的蛋白酶活性和苗期、蕾薹期、花期的脲酶的活性。综上,在N3基础上增加施氮量可以促进油菜生长、提升油菜产量和增强土壤养分、微生物、酶活性。沟施和穴施氮肥能有效提升肥效,有助于油菜生产,并改善土壤质量。