鸦胆子素D对MCF-7细胞增殖和凋亡影响及机制研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:donnastinsbt
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目的:探究鸦胆子素D对乳腺癌细胞有无增殖抑制作用,观察其对Luminal B型人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,并进一步探讨其凋亡作用机制,为临床用药提供理论依据。方法:取对数生长期人乳腺癌MCF-7细胞株用于实验,经不同药物浓度(0、5、10、20、40、80)μmol/L的鸦胆子素D分别作用24h、48h、72h后,CCK-8法(Cell Counting Kit-8)检测鸦胆子素D对MCF-7细胞增殖的影响;采取不同药物浓度分别为(0、10、20、40、80)μmol/L的鸦胆子素D作用MCF-7细胞24h后,流式细胞术检测鸦胆子素D对MCF-7细胞株凋亡及细胞周期的影响;Western Blot法检测鸦胆子素D作用于MCF-7细胞24h后JNK及p-JNK的蛋白表达。结果:1.CCK-8结果提示:经(0、5、10、20、40、80)μmol/L的鸦胆子素D分别作用于MCF-7细胞后,24h的细胞存活率为98.83%、92.13%、80.38%、68.15%、58.93%、31.25%;48h的细胞存活率为98.12%、85.93%、62.67%、48.75%、30.16%、23.53%;72h的细胞存活率为97.73%、71.42%、52.73%、39.96%、26.38%、20.13%。2.细胞凋亡结果提示:经(0、10、20、40、80)μmol/L的鸦胆子素D分别作用后,24h总细胞群中凋亡细胞百分比为6.39%、9.18%、14.83%、18.59%、23.17%。3.细胞周期结果为:经(0、10、20、40、80)μmol/L的鸦胆子素D作用24h后,G0/G1期乳腺癌细胞占比分别为51.45%、58.93%、63.16%、69.38%、77.38%;S期乳腺癌细胞占比分别为35.12%、31.08%、25.32%、22.45%、18.28%;G2/M期乳腺癌细胞占比分别为14.43%、11.99%、9.52%、7.17%、5.33%。4.Western Blot结果提示:经(0、10、20、40、80)μmol/L的鸦胆子素D作用于MCF-7细胞24h后,JNK及p-JNK蛋白表达水平随药物浓度增加而上调。结论:1.MCF-7细胞存活率随鸦胆子素D药物浓度增加而降低,且同一浓度药物作用时间越长,细胞存活率越低,呈明显时间-剂量依赖性(P<0.05,有统计学意义)。2.鸦胆子素D可诱导MCF-7细胞发生凋亡,且其增殖周期阻滞在G0/G1期(P<0.01,有统计学意义)。3.鸦胆子素D作用于MCF-7细胞株,可使JNK及p-JNK蛋白表达上调,说明鸦胆子素D可能是通过激活JNK信号通路,并进一步激活MAPK信号通路,诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡(P<0.05,有统计学意义)。
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