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猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp）是猪支原体肺炎的主要病原体,也是猪呼吸道病综合征（Porcine Respiratory Disease Complex,PRDC）的主要原发性病原之一。其主要危害是引起猪的生长受阻和饲料转化率大幅下降,严重影响养猪业的经济效益。Mhp培养物的定量检测方法主要有颜色变化单位（color change unit,CCU）检测、菌落形成单位（colony forming unit,CFU）检测、浓缩培养物的浊度测定等。鉴于上述方法费时费力,实验过程中容易污染,常引起鉴定、计数误差,本研究建立了可以对Mhp培养物定量的荧光定量PCR（Fluorescent Quantitative PCR,FQ-PCR）检测方法,并与传统的Mhp定量检测方法进行了比较,为Mhp生长特性、培养物定量等相关领域研究提供了实验依据。本研究的主要内容及结果如下:1、FQ-PCR检测方法的建立:根据GenBank公布的Mhp保守区域p110基因序列,设计一对特异引物和TaqMam探针,同时构建含有p110基因部分序列的标准质粒pEASY-T1-p110,定量后作为模板,对FQ-PCR反应条件进行了优化,建立了可以对Mhp培养物定量的的FQ-PCR检测方法。研究结果表明,该方法检测灵敏度可达13copy/μL,标准质粒拷贝数与Ct值之间的线性关系表达式为:Ct=-3.320×lg（copy/μL）+32.545;与常见的其他支原体、病毒和细菌无交叉反应;对起始浓度为1.3×105、1.3×104、1.3×103copy/μL的标准质粒的实际检测值分别为1.332×105、1.293×104和1.260×103copy/μL,对标准质粒实际检测值与理论值进行统计假设测验u测验, p的数值分别为0.5322、0.8634和0.4872（p>0.05）,两者差异不显著。证明该方法具有较高的灵敏度、良好的特异性和准确性。2、三种定量方法的比较:应用CCU检测法、浊度法和FQ-PCR法研究Mhp的生长曲线,并进行简单相关回归分析。结果表明,在Mhp的培养过程中,FQ-PCR与浊度法检测结果一直呈高度相关,其回归方程为OD=0.922398×lgcopy-6.578453;在培养54小时内,FQ-PCR与CCU法的检测结果呈高度相关,其回归方程为lgCCU =2.501728×lgcopy-13.693792。对回归方程进行检验,lgCCU/mL的理论值与实测值差异不显著（p=0.2958>0.05）,OD420的理论值与实测值差异不显著（p=0.6094>0.05）。因此该方法有很好的适用性,可以根据FQ-PCR的检测结果推算出Mhp培养物的CCU/mL值与浊度。