【摘 要】
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以B.FlavumSFL-8为出发菌株，通过紫外线、盐酸羟胺多次单独和复合诱变处理，采用利福平抗性平板筛选和摇瓶发酵筛选相结合的方法，获得一株B.FlavumUH-1菌株，L-亮氨酸产量从出发菌
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以B.FlavumSFL-8为出发菌株，通过紫外线、盐酸羟胺多次单独和复合诱变处理，采用利福平抗性平板筛选和摇瓶发酵筛选相结合的方法，获得一株B.FlavumUH-1菌株，L-亮氨酸产量从出发菌株B.FlavumSFL-83.5g/L提高到12.85g/L，实验证明B.FlavumUH-1为一株蛋氨酸缺陷型(Met-)；以B.FlavumUH-1(Met-)为出发菌株，采用硫酸二乙酯和氯化锂进行多次单独和复合诱变处理，通过摇瓶发酵初筛和复筛以及分离纯化，获得一株蛋氨酸和异亮氨酸双缺陷型菌株B.FlavumDL-2(Met-、Ile-)，摇瓶发酵L-亮氨酸产量为18.56g/L。
研究了碳源等因素对B.FlavumDL-2菌株种子生长、发酵产酸的影响，初步确定了B.FlavumDL-2菌株发酵生产L-亮氨酸的工艺参数。
结果表明，B.FlavumDL-2种子培养时培养基的最佳配比为：葡萄糖20g/L、硫酸铵5g/L、磷酸二氢钾0.5g/L、硫酸镁0.4g/L、玉米浆30mL/L、豆饼水解液20mL/L，pH7.0；培养条件：30℃，150r.p.min，培养时间11h。
研究确定的B.FlavumDL-2分批发酵生产L-亮氨酸的较佳培养基组成(g/L)：葡萄糖120，硫酸铵20，醋酸铵10，磷酸二氢钾0.5，硫酸镁0.4，玉米浆25mL/L，豆饼水解液15mL/L，碳酸钙35，生物素20μg/L，pH7.0。
较佳发酵条件：温度30℃，pH7，装量40mL/500mL三角瓶，转速200r.p.min，接种量8％，发酵时间78h。
在较佳培养基及培养条件下，B.FlavumDL-2分批发酵生产L-亮氨酸25.6g/L。转化率21.4％。
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