论文部分内容阅读
目的:槐定碱(SRI)是一种四环的喹嗪啶类生物碱,动物实验研究发现其能够显著拮抗戊巴比妥钠引起的催眠作用,具有明显的中枢兴奋作用。本文采用腹腔注射槐定碱建立SD大鼠化学点燃癫痫模型,并探讨其作用机制。
方法:①采用序贯法测定SRI大鼠腹腔注射的半数致死量(LD50);②将SD大鼠随机分为生理盐水对照组和实验组,实验组又分为6个剂量组,依照寇氏法安排SRI剂量,第1组:腹腔注射SRI 32.81 mg/kg;第2组:35.62 mg/kg;第3组:38.68 mg/kg;第4组:41.99 mg/kg;第5组:45.59 mg/kg;第6组:49.5 mg/kg。腹腔注射SRI后,观察大鼠行为变化,BL-420生物机能实验系统描记大鼠海马脑电图,并用改进寇氏法测定SRI致癫痫的半数有效量(ED50);③放射免疫分析方法测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-8(IL-8)的水平;④免疫组织化学方法测定海马组织中谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)阳性神经元表达的变化。
结果:①SRI腹腔注射的LD50值为46.66 mg/kg。②腹腔注射SRI后,大鼠出现了痫性行为发作,表现为凝视、不动或头面部肌肉抽搐,前肢阵挛、直立,前肢抬起不断扑动或全身肌肉阵挛性收缩,四肢抽搐,强直阵挛,原地打转,跳跃、奔跑、翻滚倒地。随着SRI剂量的增加,痫性发作的潜伏期缩短、持续时间延长、发作程度加重,第3组~第6组与第1组相比,差异显著(P﹤0.05);并且癫痫的发生率逐渐升高,第4、第5和第6组与第1组相比,差异显著(P﹤0.05)。海马EEG表现为典型的痫样脑电变化,呈单个散在或反复连续发放的棘波,或连续性棘慢综合波和弥漫性棘慢综合波。③SRI腹腔注射致癫痫的ED50为40.66 mg/kg。④SRI组和青霉素组大鼠血清TNF-α、IL-6和IL-2水平均明显高于生理盐水对照组(P﹤0.05),两组之间无差别(P﹥0.05);SRI组和青霉素组大鼠血清IL-8水平无明显变化(P﹥0.05);相关分析发现,SRI组大鼠血清TNF-α与IL-2水平之间呈正相关(r=0.872,P﹤0.01)。⑤SRI组和青霉素组海马组织Glu免疫反应阳性神经元数目明显高于生理盐水对照组,GABA免疫反应阳性神经元数目明显低于生理盐水对照组(P﹤0.05),而两组之间无差别(P﹥0.05)。
结论:槐定碱腹腔注射可在大鼠引发典型的痫样发作行为和痫样脑电,其发作形式、脑电图特征与人类癫痫非常相似。槐定碱致痫后大鼠血清中TNF-α、IL-6和IL-2水平升高,提示TNF-α、IL-6和IL-2在槐定碱所致的癫痫发病中可能起促进作用。槐定碱致痫后,大鼠海马组织中Glu免疫反应阳性神经元表达增加,GABA免疫反应阳性神经元表达减少,提示Glu和GABA可能参与了槐定碱所致的癫痫活动。