论文部分内容阅读
目的:
建立稳定、可靠的胰岛素诱导新生大鼠单次持续低血糖模型，应用离体高分辨磁共振波谱技术(HR1H-MRS)分析该模型大鼠海马及枕叶皮层代谢物的变化，同时辅以病理检测其神经元损伤情况，研究新生期单次持续低血糖对大鼠海马及枕叶皮层的影响，同时探索新生儿低血糖脑损伤的有效干预方法。
方法:
将135只SD新生大鼠按随机数字法，分为对照组、低血糖组及干预组，各45只。每组根据不同处死时间，再分为新生期（出生后8天）、幼年期（出生后21天）及成年期（出生后60天），各15只。出生后第7天，所有大鼠禁食2h，低血糖组大鼠予腹腔注射胰岛素40U/kg，诱导新生大鼠低血糖;干预组则在低血糖组模型的基础上予腹腔注射3-氨基甲苯酰胺(30mg/g);对照组则给予等量生理盐水。每个时期，各组随机选取9只大鼠分离并萃取双侧海马、枕叶皮层用于1H-MRS研究。余下6只大鼠取全脑经石蜡包埋后用于Tunel及免疫组织化学染色检测神经元损伤及GFAP阳性细胞增生情况。
结果:
1.代谢物变化:
1.1.海马与新生期对照组相比，新生期低血糖组大鼠共有7种代谢物的浓度发生显著改变(P＜0.05)，分别为谷氨酰胺(Gln)及牛磺酸(Tau)浓度上升，琥珀酸(Suc)、天冬氨酸(Asp)、肌醇(my-Ins)、N-乙酰天门冬氨酸（NAA）及甘氨酸(Gly)浓度下降。新生期干预组与新生期低血糖组相比，my-Ins、Gly浓度回升;且其与新生期对照组相比，my-Ins、NAA、Gly恢复正常，而Suc、Asp、Gln、Tau浓度仍有改变，但改变程度较新生期低血糖组明显减轻;动物随访至幼年期及成年期时，三组大鼠海马代谢物变化均无统计学差异(P＞0.05)。
1.2.枕叶皮层与各时期对照组相比，新生期低血糖组仅有胆碱(Cho)浓度上升，幼年期仅有乳酸(Lac)浓度上升，而成年期乳酸(Lac)及丙氨酸(Ala)浓度下降，肌酸(Cre)及NAA浓度则上升，三个时期其他代谢物变化均无统计学差异(P＞0.05)。
2.病理情况
2.1.变性神经元检测较新生期对照组，新生期低血糖组海马CA1、CA3及DG区的变性神经元均增多，以DG区最为明显，差异有统计学意义(p＜0.001)。较新生期低血糖组，新生期干预组海马CA1、CA3及DG区的变性神经元均减少，差异有统计学意义(p＜0.001);较新生期对照组，新生期干预组海马DG区的变性神经元增多，差异有统计学意义(p＜0.001)，而CA1、CA3区恢复正常。动物成长至幼年期及成年期时，各组海马各区变性神经元均无明显增多，差异无统计学意义(p＞0.05)。较各时期对照组，枕叶皮层低血糖组变性神经元均无明显增多，差异无统计学意义(p＞0.05)。
2.2 GFAP阳性细胞检测幼年期及成年期海马、枕叶皮层各组间GFAP阳性细胞数量均未见明显增多或减少，差异无统计学意义(p＞0.05)。
结论:
1.新生大鼠单次持续低血糖对海马及枕叶皮层代谢模式的影响、神经元的损伤存在区域性差异。
2.新生期单次持续低血糖可引起新生期海马代谢物一系列可逆性的改变及神经元短暂、可逆的损伤。
3.新生期单次持续低血糖后大鼠新生期枕叶皮层代谢无显著改变，但随访至幼年期及成年期时能量相关代谢物出现改变，这可能与星形胶质细胞对神经元保护及供能的加强和成年期神经元活性的代偿性增高有关。
4.3-AB能有效减轻新生大鼠单次持续低血糖引起的海马区代谢紊乱及神经元损伤，调控神经递质代谢通路，对未成熟脑起到保护作用。