【摘 要】
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中生菌素是由淡紫灰链霉菌海南变种产生的N-糖苷类农用抗生素，对农作物细菌性病害及某些真菌病害具有良好的防治效果。 本文以C5为原始出发菌株，以对两种指示菌的抑制能力均较强作为衡量高产菌株的指标，运用不同的诱变方法选育出中生菌素高产菌株UV-69、E-25和6937，并对它们进行了遗传稳定性测试和发酵培养基的优化。其主要内容有以下几个方面： 1．采用正交试验筛选出适合C5生长、产素和孢子
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中生菌素是由淡紫灰链霉菌海南变种产生的N-糖苷类农用抗生素，对农作物细菌性病害及某些真菌病害具有良好的防治效果。 本文以C5为原始出发菌株，以对两种指示菌的抑制能力均较强作为衡量高产菌株的指标，运用不同的诱变方法选育出中生菌素高产菌株UV-69、E-25和6937，并对它们进行了遗传稳定性测试和发酵培养基的优化。其主要内容有以下几个方面： 1．采用正交试验筛选出适合C5生长、产素和孢子预萌发的培养基，并加以改进，获得效价初筛培养基，建立了效价初筛模型。 2．采用孢子预萌发后进行紫外线照射实验表明：孢子预萌发3h后进行紫外线照射效果最好，正变率、突变率大大增加。通过该方法筛选出一株对真菌和细菌都有较好抑制效果的高产、稳产菌株UV-69，摇瓶平均发酵效价为3745μg/ml，比出发菌株C5摇瓶发酵效价（2650μg/ml）提高了41.32％，且传代性能稳定。高产菌株UV-69大罐（20吨）发酵平均效价为4370μg/ml，比C5（3000μg/ml）提高了45.67％。 4．采用电子束注入及电子束注入与紫外复合诱变实验表明：电子束注入与紫外复合诱变效果显著，正变率虽稍低于电子束注入40S的正变率，但明显高于其它单独采用电子束注入，而且正变幅度大。采用E5s+UV15s处理后，获得高产菌株E-25，最高摇瓶发酵效价为4075μg/ml，比出发菌株C5摇瓶发酵效价提高了53.78％。 5．采用紫外照射后进行AEC耐受试验表明：紫外照射后进行10μg/ml AEC耐受，正变率明显高于单独采用紫外照射或紫外照射后进行较低浓度AEC耐受，且正变幅度较大，效价最高达4450μg/ml；单独采用紫外照射处理正变幅度最大，获得高产菌株6937，效价最高为4525μg/ml，比UV-69产量提高了22.30％；选取4株高产菌株6937、6904、A-02和A-23进行传代发现有3株发生效价回复，只有6们7产量基本未变，是一株较好的高产、稳产菌株。 6．采用紫外照射后进行 2呷加l Sir耐受，正变率和正变幅度均高于单独采用紫外照射。 7．通过正交试验改进摇瓶发酵培养基，组合3效价最高，达至 5200pm／ml，比 6937在旧 配万条件下（4380pm／ml）提高了18．7狐，比原始出发菌株CS产量提高了9623人 通过方差分析获得适合6937产素的最佳配方，即葡萄糖1儿 淀粉0．5儿 黄豆饼粉2儿 玉米粉1．5儿 氯化镀0．6丸 氯化钠0．6儿 碳酸钙0．45％。
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