鸡新城疫病毒HeB02株的分离鉴定及其F基因的克隆和表达

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  本论文从有神经症状的病死鸡的脑组织中分离出一株病毒,通过对分离株进行MDT(77h)、ICPI(1.1)、IVPI(2.63)等生物学试验、空斑试验及电镜观察等,设计了一对引物(P1、P2),分别含有酶切位点KpnI、BamHI,以HeB02基因组为模板,扩增出F基因片段,将其连接到pGEM-T载体,构建了重组质粒pST-F并对片断进行了测序,将F基因定向克隆于真核表达载体pVAXl中,构建了重组质粒pSV-F,转染COS-1细胞,SDS-PAGE电泳可见表达的特异蛋白条带。经Westernblotting,ELISA和中和试验检测,表达产物与相应抗体可发生特异性反应,说明F基因真核表达的蛋白具有很好的反应原性。   
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