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对脱落酸(ABA)启动非跃变型果实成熟机制的研究,很重要的一方面是对其胞内信号组分的鉴定.首先运用原位自磷酸化和Western印迹方法,该文对葡萄果实(Vitis Vinifera L.×V.lubrusca L.cv.Kyoho)钙依赖蛋白激酶进行了研究.结果表明葡萄果实微粒体膜存在一分子量大约为62.5KD的蛋白激酶,其生化特征在以下几方面类似于其它植物钙依赖蛋白激酶(CDPKs):(1)在体外,62.5KD的蛋白激酶可以磷酸化组蛋白Ⅲ-S;(2)62.5KD的蛋白激酶自磷酸化和蛋白激酶活性依赖于Ca<++>;(3)62.5KD的蛋白激酶自磷酸化不依赖于CaM,但可被CaM拮抗剂W-7所抑制;(4)62.5KD的蛋白激酶自磷酸化表现出典型的Ca<++>依赖电泳迁移率改变;(5)大豆CDPK多克隆抗体可以识别62.5KD的蛋白激酶.因此,62.5KD的蛋白激酶属于CDPKs家族.同时,增溶试验表明,62.5KD的蛋白激酶是一种膜内在结合蛋白.其次,利用蛋白激酶原位自磷酸化方法,研究发现外源的ABA处理果实圆片,可以迅速增强微粒体62.5KD钙依赖蛋白激酶自磷酸化和蛋白激酶活性.总之,上述结果表明,62.5KD钙依赖蛋白激酶在ABA调控果实发育成熟胞内信号转导中具有极其重要的作用.