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目的:本研究的目的是合成并观察熊果酸和阿司匹林的新型偶联物Asp-UA对乳腺癌侵袭转移能力的作用,研究其体内外抗肿瘤转移的活性及其对细胞内粘附转移信号通路中相关基因和蛋白表达水平的影响,探讨该偶联物抗乳腺癌粘附转移的分子机制。方法:对熊果酸和阿司匹林进行偶联反应制得熊果酸-阿司匹林偶联物,采用IR、1HNMR和MS对其结构进行确证;采用MTT法对Asp-UA进行细胞毒性检测,测定其对不同乳腺癌细胞及人源正常细胞的毒性,筛选出药物安全有效的浓度范围;体外实验采用细胞粘附、迁移及侵袭实验分别检测Asp-UA对乳腺癌细胞相应能力的影响;体内实验采用4T1细胞BALB/c小鼠实验性肺转移模型,评价Asp-UA的体内抗肿瘤转移活性;我们利用流式细胞术、Western blot、qRT-PCR法、免疫组化法以及免疫荧光法研究了 Asp-UA在体内外抑制乳腺癌转移的机制,检测乳腺癌粘附、侵袭相关基因及蛋白表达,以及其对乳腺癌整合素相关信号通路、EMT信号通路中有关蛋白的影响。结果:在低浓度范围内,Asp-UA对乳腺癌细胞和正常细胞的毒性都比较小;与对照组、UA和Asp相比,Asp-UA对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞的粘附、迁移及侵袭均具有更加明显的抑制作用,且呈一定的量效关系。体内4T1小鼠乳腺癌实验性肺转移模型的结果显示,80 mg/kg的各药物灌胃28天后,小鼠肺转移结节数均有所减少,并且Asp-UA的抑制效率明显高于UA和Asp,同时我们未发现小鼠体重下降以及内脏组织毒性等明显药物毒副作用。进一步的研究发现,Asp-UA能明显抑制MMP-2、MMP-9、COX-2等肿瘤侵袭相关蛋白酶在蛋白和基因水平的表达。此外,Asp-UA有效调控乳腺癌细胞粘附转移信号通路中整合素α6β1、CD44、EGFR、ERK和PTEN的表达以及EMT信号通路中E-cadherin、β-catenin 蛋白的表达。结论:在安全有效的浓度范围内,Asp-UA体内外均能显著的干预乳腺癌细胞的转移而不显著影响肿瘤细胞和正常细胞的生长;其抗乳腺癌粘附转移的机制可能是通过下调肿瘤细胞细胞相关粘附、侵袭分子的表达及调控乳腺癌细胞中EMT、整合素介导相关信号通路的传导,从而抑制乳腺癌转移的发生。