【摘 要】
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细胞周期的调控是当前国际上生命科学研究的重要内容和热点问题,细胞周期研究不仅是理解生命现象的重要途径,也是治疗癌症和肿瘤等疾病的必由之路。APC/C（anaphase promoting
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细胞周期的调控是当前国际上生命科学研究的重要内容和热点问题,细胞周期研究不仅是理解生命现象的重要途径,也是治疗癌症和肿瘤等疾病的必由之路。APC/C（anaphase promoting complex/closome）,即胞周期后期促进复合物是广泛存在的调控细胞周期的E3泛素连接酶。APC/C在细胞的有丝分裂期后期激活,调控细胞完成有丝分裂。在哺乳动物细胞中APC/C是一个1.5MD的包含超过11个亚基的分子复合物,其中Apc2和Apc11发挥了催化核心的作用,Apc10有着介导底物识别的功能。我们在酵母双杂交实验中发现了与Apc10结合的一个激酶,由于它与酵母中的Rio kinase2有着很高的同源性,所以称其为RIOK2。我们通过免疫共沉淀实验和GST-pulldown实验证明了RIOK2在真核细胞中通过氨基端的激酶区与Apc10结合,并发现它与Apc11结合。我们通过表达纯化RIOK2的羧基端部分,免疫新西兰大白兔制作了具有高灵敏度和特异性的抗体,为下一步实验打下了基础。由于APC/C是调控细胞周期的主要复合物,我们在293T细胞中过表达RIOK2并结合细胞同步化技术,最后通过流式细胞术检测其对周期影响,发现RIOK2有将细胞滞留在G2/M期的作用,需要进一步实验证实。
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