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本研究以木质素磺酸钠为唯一碳源的培养基对凉水自然保护区土壤样品进行富集培养,涂布于愈创木酚-PDA选择性培养基上。经ABTS和丁香醛联氮检平板检测初筛,ABTS法测定摇瓶发酵液酶活力复筛,筛选到一株漆酶高产真菌NF-05。形态学观察结合rDNA-ITS序列分析,鉴定该菌为半知菌亚门疣孢漆斑菌(Myrothecium verrucaria)。初筛产酶活力即达到8375.9U/L。目前对Myrothecium verrucaria的研究主要集中在胆红素氧化酶在医药与电化学应用方面,对能够高产漆酶的Myrothecium verrucaria研究并应用到环保领域的报道比较少见。通过单因素实验初步优化得到了疣孢漆斑菌NF-05产漆酶培养基组成成分及最适发酵条件,在单因素试验的基础上,应用Plackett-Bunnan设计和响应面(RSM)分析对菌株NF-05发酵产漆酶的条件进行了进一步的系统优化。根据响应面设计结合单因素实验结果得到菌株NF-05的最佳产酶培养组合及发酵条件:CuS040.09mmol/L,葡萄糖62.89g/L,COC120.25mmol/L,Fe2(S04)30.15mmol/L,蛋白胨14.0g/L,KH2P043.0g/L,NH4C11.0g/L,MgS04·7H201.5g/L,马铃薯200g/L煮汁,维生素溶液0.5mL/L;采用菌饼的方式进行接种,接种量为6%,接种平板菌龄选择在15d,装液量60mL/250mL,摇床转速120r/min,初始pH6.0/及培养温度28℃。采用优化后的培养基菌株NF-05酶活达到45082.6U/L,比优化前提高了4.38倍。本研究对疣孢漆斑菌NF-05自固定化菌丝球在四大类染料的降解方面进行了研究,结果表明菌丝球对多种染料均有一定程度的降解作用,其中对三苯甲烷类染料脱色率最高(24h后孔雀绿和结晶紫脱色率分别为66.9%、63.2%),因此确定孔雀绿作为NF-05自固定化菌丝球的研究对象。外加碳源、外加氮源及金属离了对菌株NF-05自固定化菌丝球脱色率的影响结果表明:在有5g/L外加碳源、3g/L外加氮源加入的情况下,自固定化菌丝球对染料溶液的脱色能力明显增强;金属离子Cu2+、Fe3+、Co2+对孔雀绿脱色具有较好的促进作用,其中Cu2+的促进作用最明显;A13+、Na+、Mg2+作用不明显;浓度较高的Ca2+具有明显抑制作用。菌丝球最大染料负荷实验表明:孔雀绿浓度75mg/L,自固定化菌丝球循环利用5次,单位菌丝球降解染料总负荷最高,可达18.05mg,此时自固定化菌丝球对孔雀绿染料废水具有很好的脱色能力。本研究是在利用真菌处理染料废水方面的有益尝试,为疣孢漆斑菌NF-05在生物膜法处理染料废水方面的模型构建方面奠定了一定理论基础。