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1.鸭肠炎病毒UL18基因的序列特征与密码子使用偏爱性运用生物信息学分析软件对注册的鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV) UL18基因(GenBank登录号为EU195093)及其编码蛋白进行了分析。结果表明,DEVUL18基因大小969bp,编码蛋白为一条含322个氨基酸残基组成的多肽,相对分子量为35.250KD,等电点理论值为8.37,无信号肽切割位点,含有15个潜在的磷酸化位点和2个N-糖基化位点,含15个潜在的B细胞表位；系统进化分析结果表明,DEVUL18属于α-疱疹病毒的一个成员,与MeHV-1的亲缘关系最近；密码子偏爱性分析结果表明,若要对DEVUL18基因进行外源表达,真核表达系统可能更容易。若选择原核表达系统,则需要对宿主表达菌进行选择和条件优化,才能有利于该基因在体外表达重组蛋白。2.鸭肠炎病毒UL18基因的原核表达、抗体制备及应用根据注册的DEV UL18基因序列,用Primer Premier6.0软件设计合成一对特异性扩增DEVUL18基因的引物。用该引物从DEV基因组中扩增UL18基因,并将其正向插入pET32a(+)原核表达质粒,成功构建了原核表达质粒pET32a-UL18。将pET32a-UL18原核表达质粒转化BL21(DE3)表达宿主菌,以IPTG诱导,获得了大小约为55KD且主要以包涵体形式存在的pET32a/DEV-UL18重组蛋白。将该重组蛋白纯化后免疫家兔,得到了兔抗pET32a/DEV-UL18重组蛋白的高免血清。以纯化的pET32a/DEV-UL18重组蛋白作为包被抗原,建立了基于pET32a/DEV-UL18重组蛋白的间接ELISA方法；以纯化的兔抗pET32a/DEV-UL18重组蛋白IgG作为一抗,建立了基于兔抗UL18重组蛋白IgG的免疫组化和免疫荧光方法,并对DEV感染鸭组织和鸭胚成纤维细胞后UL18蛋白的分布进行了检测。3.鸭肠炎病毒UL18基因在感染宿主细胞中的转录与表达特征采用荧光定量RT-PCR和Western blotting对DEV感染鸭胚成纤维细胞(DEF)后UL18基因的转录和表达情况进行了检测。结果表明,DEV感染DEF后2h,UL18基因已经开始转录,感染后12h检测到开始表达,感染24h后转录和表达产物急剧上升,到36h和48h后转录和表达产物分别达最大值,之后逐渐下降。DEV UL18基因在DEF细胞中的表达产物分子量约为35KD。根据该基因的转录和表达特征,初步推测DEV UL18基因为病毒晚期基因。