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目的: 通过检测肿瘤坏死因子a诱导蛋白3(tumor necrosis factor,alpha-induced protein3,TNFAIP3)mRNA及其蛋白在膀胱尿路上皮乳头状癌(urothelial papillary carcinoma,UPC)组织中的表达情况,探讨其在膀胱癌发生,发展中的作用。寻找与膀胱肿瘤发生,发展相关的分子标记物,从而为膀胱肿瘤的诊断、治疗及预后判断等提供新的思路。 方法: 1.根据Genebank中的TNFAIP3 mRNA的参考序列(NM_006290.2),设计上下游引物,采用SYBR GreenⅠ荧光定量实时聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)检测62例膀胱UPC组织及20例正常膀胱组织中TNFAIP3 mRNA的相对表达量,以GAPDHmRNA为内参进行校正,用TNFAIP3 mRNA/GAPDH mRNA比值来表示TNFAIP3 mRNA的相对表达量,采用2-△Ct方法计算,△Ct=CtTNFAIP3 mRNA-CtGAPDH mRNA。 2.采用免疫组化Envision法检测62例膀胱UPC组织及20例正常膀胱组织中TNFAIP3蛋白的表达情况。 3.用统计软件分析膀胱UPC组织中TNFAIP3 mRNA及其蛋白的表达情况与正常膀胱组织是否有统计学差异,ROC曲线对TNFAIP3 mRNA诊断UPC的价值进行分析,同时对TNFAIP3 mRNA及其蛋白的诊断性能评价进行比较,并结合患者的临床资料分析TNFAIP3的表达与UPC临床参数的关系。 结果: 1.膀胱组织中TNFAIP3 mRNA的表达情况:实时荧光定量PCR法检测TNFAIP3mRNA在62例UPC组织和20例正常膀胱组织中均有表达,其相对表达量分别为3.29×10-4(0.54×10-4~16.60×10-4),0.46×10-4(0.17×10-4~0.90×10-4),UPC组织中的表达水平高于正常膀胱组织,差异具有统计学意义(Z=-3.729,P<0.05)。 2.膀胱组织中TNFAIP3蛋白的表达情况:免疫组化法检测62例UPC组织和20例正常膀胱组织TNFAIP3蛋白的表达情况,UPC组织阳性表达率75.8%(47/62),正常组织阳性表达率0%(0/20),UPC组织中蛋白的表达比正常组织明显增加,差异具有统计学意义(x2=39.601,P<0.05)。 3.TNFAIP3 mRNA及其蛋白诊断UPC的性能评价:ROC曲线分析结果显示:当TNFAIP3 mRNA/GAPDH mRNA×10-4的临界值为0.89时,曲线下面积ROC-AUC=0.811。通过TNFAIP3 mRNA及其蛋白对UPC的诊断性能评价的比较显示:TNFAIP3 mRNA的诊断灵敏度低于TNFAIP3蛋白(72.6%vs91.9%),但其特异度较高(85.0%vs65.0%)。 4.TNFAIP3的表达与UPC患者临床病理参数的关系:TNFAIP3 mRNA及其蛋白在UPC组织中的表达水平与患者肿瘤的病理分级,浸润深度及淋巴转移密切相关(P均<0.05),而与患者的性别,年龄无关(P均>0.05)。 结论: TNFAIP3 mRNA及其蛋白在膀胱UPC组织中表达上调,并与肿瘤的分级,浸润和转移相关,提示其可能参与了膀胱肿瘤的发生和发展;并且TNFAIP3 mRNA及其蛋白在诊断UPC中有一定的灵敏度和特异度,是有价值的膀胱肿瘤生物学行为标记物,有望成为膀胱癌新的治疗靶点。