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背景:肾纤维化是各种慢性进行性肾病的共同病理学特征,最终将发展为终末期肾衰竭。上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）是促进肾纤维化的重要分子机制,它是指上皮细胞在外界病理损伤因素的刺激下,失去上皮细胞的某些特性,同时获得部分间质细胞特性的生物学过程。肾小管上皮细胞（tubular epithelial cells,TEC）是肾实质的主要细胞,对维持正常的肾功能极其重要,暴露在各种有害刺激下极易受到损伤。现已报道在肾纤维化的过程中,TEC可通过EMT向肌成纤维细胞转化,从而促进肾纤维化。TRPC6广泛存在于肾的各种细胞中,包括足细胞、肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞。其基因突变或者活性改变,可诱发多种肾脏疾病发生。有研究报道,在肾纤维化过程中,TRPC6表达升高,抑制其活性或者敲除TRPC6可在一定程度上减轻纤维化带来的肾脏损伤,对肾脏具有一定的保护作用。但是此保护效应是否与TEC发生的EMT有关尚不清楚,这需要进一步的研究。目的:本研究从体内和体外实验两个方面着手,以TRPC6基因敲除(TRPC6knockout,TRPC6-/-)小鼠和WT（129Sv Ev）小鼠为实验对象,在构建的肾纤维化模型和TGF-β1诱导的原代培养的TEC中,旨在研究肾纤维化过程中TRPC6对TEC发生的EMT的调节作用;探索TRPC6调节EMT所涉及的分子信号通路;阐明TRPC6对TEC上肾功能相关蛋白Na+/K+-ATPase和AQP1的影响。方法:第一部分体内实验:本研究以WT（129Sv Ev）和TRPC6-/-小鼠为实验对象,构建单侧输尿管结扎（unilateral ureteric obstruction,UUO）肾纤维化模型,采用HE、Masson和Sirius red技术检测UUO后的肾纤维化损伤;采用免疫荧光和Western Blot技术检测肾组织中的EMT分子标记、TRPC6、信号通路相关分子（AKT,m TOR,ERK1/2）以及TEC上Na+/K+-ATPase和AQP1的表达水平。第二部分体外实验:本研究采用WT和TRPC6-/-小鼠,从肾皮质中分离培养TEC,经TGF-β1诱导处理72 h后,利用免疫荧光和Western Blot技术检测TEC上的EMT标记分子、TRPC6、信号通路相关分子（AKT、m TOR、ERK1/2）以及Na+/K+-ATPase和AQP1的表达水平。结果:1、UUO后,手术肾中出现明显的间质纤维化。肾皮质分离培养的TEC经TGF-β1诱导后,形态上也发生了明显的纤维变化。且在这两个试验中均发现TRPC6表达升高,EMT被活化2、在UUO诱导的肾纤维化模型和TGF-β1处理的原代TEC中,敲除TRPC6均可抑制EMT。3、在UUO诱导的肾纤维化模型和TGF-β1处理的原代TEC中,AKT-m TOR和ERK1/2信号通路被活化,敲除TRPC6均可下调此信号通路。4、在UUO诱导的肾纤维化模型和TGF-β1处理的原代TEC中,通道蛋白Na+/K+-ATPase和AQP1的表达水平明显下降,敲除TRPC6后丢失的Na+/K+-ATPase和AQP1可部分恢复。结论:敲除TRPC6可能通过下调AKT-m TOR和ERK1/2信号通路抑制TEC中的EMT,同时肾功能相关通道蛋白Na+/K+-ATPase和AQP1部分恢复,从而减轻肾纤维化,改善肾功能。