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炎症在肿瘤发生发展的各个过程中都发挥了重要的作用,包括肿瘤的起始、增殖、恶性转化、侵袭和转移。IL-6/STAT3和TNF-α/NF-κB信号通路是介导炎症向肿瘤转化的重要途径,多种肿瘤组织和细胞中都存在这两条信号通路的持续性激活,因此相关抑制剂的开发是研究热点之一。天然化合物是目前化学药物的重要来源,也是中药发挥作用的分子基础。因此本文的主要研究目的是从中草药化学组分中筛选具有调节STAT3或NF-κB信号通路功能的先导化合物。 我们利用稳定转染STAT3和NF-κB荧光素酶报告基因的细胞筛选模型,对几百种中药组分进行了筛选,并得到了一系列候选药物。其中来源于中药虎杖的天然小分子化合物2-MS能够同时抑制IL-6/STAT3和TNF-α/NF-κB信号通路,进一步研究表明2-MS是JAK2和IKKβ激酶的抑制剂。2-MS对信号通路和激酶活性的抑制都是特异性的。DTT或谷胱甘肽能够消除2-MS对STAT3和NF-κB信号通路的抑制作用,而且用2-MS短暂处理细胞撤药后,2-MS对STAT3和NF-κB信号通路的抑制作用仍然能够持续4个小时。利用生物素标记的方法,我们证明2-MS能够直接与JAK2和IKK蛋白结合。这些结果提示我们2-MS可能是通过与JAK2或IKKβ半胱氨酸上的巯基共价结合来抑制JAK2和IKKβ激酶活性的。2-MS能够抑制多种肿瘤细胞的生长,而且这种抑制作用与肿瘤细胞中STAT3和NF-κB信号通路的活化情况密切相关。 本文第二部分内容是对葫芦素家族化合物葫芦素Ⅰ抑制IL-6/STAT3信号通路,增强IFN-γ/STAT1信号通路的作用机制,及其与其它酪氨酸激酶抑制剂的协同抗肿瘤作用机理进行了研究。研究表明葫芦素Ⅰ对IL-6/STAT3信号通路的抑制作用和对IFN-γ/STATI信号通路的增强作用都是通过靶向细胞微丝骨架造成的。DTT或谷胱甘肽能够消除葫芦素Ⅰ对细胞微丝骨架的破坏作用和对STAT3信号通路的抑制作用。在功能方面,葫芦素I能够抑制多种肿瘤细胞的生长,而且这种抑制作用与肿瘤细胞中STAT3信号通路的活化情况密切相关。葫芦素Ⅰ能够增强IFN-γ的抗肿瘤作用。当将葫芦素Ⅰ与其它酪氨酸激酶抑制剂联合使用时具有协同抗肿瘤作用,而且这种协同作用只存在于上皮来源的肿瘤细胞中,而在血液来源的肿瘤细胞中不具有协同作用。