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忍冬(Lonicera japonica Thunb.)为忍冬科(Caprifoliaceae)忍冬属(Lonicera)多年生常绿缠绕藤本植物,是我国传统中药,具有清热解毒、抗菌消炎等多种药用功效。忍冬茎叶为忍冬采取干燥花蕾后的下脚料,常作为废弃物处理,其化学成分复杂,研究者们已经分离得到的主要包括有机酚酸类、黄酮类、皂苷类、环烯醚萜类、木脂素类等多种化合物。这其中黄酮和有机酚酸两类化合物是忍冬作为传统中药的重要药理活性成分,具有优良的抗氧化活性。本论文总结了忍冬抗氧化活性成分,并综述了中草药抗氧化活性的研究进展,以产自陕西汉中南郑县金银花基地的忍冬茎叶为原材料,对其乙醇提取物经大孔吸附树脂初步分离得到的不同相浸膏采用DPPH·法、邻苯三酚法、邻二氮菲法三种不同的方法进行抗氧化活性研究,并对抗氧化活性明显优于其它部分的20%乙醇相和40%乙醇相的化学成分进行了系统的分离纯化,对得到单体化合物进行了结构鉴定。1.本研究以Vc作为阳性对照,采用DPPH·法、邻苯三酚法、邻二氮菲法三种方法对忍冬茎叶乙醇提取物进行抗氧化活性研究,探讨了忍冬提取物对DPPH·、O·2-、·OH的清除作用,并计算出每一个洗脱相清除三种自由基的IC50值,结果如下:忍冬提取物清除DPPH·自由基活性结果:40%乙醇洗脱部分的DPPH·自由基清除活性最高,其IC50值为44.2μg·mL-1;忍冬茎叶乙醇提取物经过大孔吸附树脂不同浓度乙醇洗脱部分清除DPPH·自由基的能力由大到小(即IC50值由小到大)的顺序为:Vc>40%乙醇相>20%乙醇相>60%乙醇相>80%乙醇相>水相>醇相;忍冬提取物清除超氧阴离子(O·2-)能力结果:40%乙醇相洗脱部分的超氧阴离子(O·2-)清除活性最高,其IC50值为138.9μg·mL-1;忍冬茎叶乙醇提取物经过大孔吸附树脂不同洗脱部分清除超氧阴离子(O·2-)活性由大到小(即IC50值由小到大)的顺序为:Vc>40%乙醇相>20%乙醇相>60%乙醇相>醇相>水相>80%乙醇相;忍冬提取物清除羟基自由基(·OH)能力结果:20%乙醇洗脱部分对于羟基自由基(·OH)清除活性最高,其IC50值为54.0μg·mL-1。忍冬茎叶乙醇提取物经过大孔吸附树脂不同洗脱部分清除羟基自由基(·OH)活性由大到小(即IC50值由小到大)的顺序为:Vc>20%乙醇相>40%乙醇相>60%乙醇相>80%乙醇相>醇相>水相。2.本研究中,综合运用大孔吸附树脂柱层析、硅胶柱层析,葡聚糖凝胶柱层析,薄层制备及重结晶等分离纯化技术从忍冬茎叶乙醇提取物中经过初步抗氧化活性筛选的具备较优抗氧化能力的20%乙醇相(Fr.2)和40%乙醇相(Fr.3)中分离得到了8个化合物。结合与标准品进行CO-TLC检测、混合测定熔点检测方法、EI-MS、13C-NMR、1H-NMR等波谱方法对分离得到的单体化合物进行结构鉴定和解析,得到了6个化合物:Z1β-谷甾醇(β-sitosterol)、Z3阿魏酸(Ferulic acid)、Z4咖啡酸(Caffeic acid)、Z6绿原酸(Chlorogenic acid)、Z7槲皮素(Quercetin)和Z85,4’-二羟基-7-甲氧基异黄酮(5,4’-dihydroy-7-methoxy-isoflovone)。其中化合物Z8是首次从该植物中分离得到。忍冬作为一种传统中药,其有效成分有机酚酸和黄酮类化合物具有包括抗氧化活性在内的重要药理活性。本文对忍冬茎叶的乙醇提取物进行了较为系统的抗氧化活性研究,初步明确了忍冬茎叶醇提物中抗氧化活性较好的部分;再从这两个部分中分离得到8个化合物,结构解析表明有3个化合物是有机酚酸类,2个化合物是黄酮类,都具有一定的抗氧化活性。忍冬茎叶和金银花的化学成分相似,药理作用接近,对其抗氧化活性成分的研究结果可为综合开发利用忍冬资源提供一定的理论依据。