【摘 要】
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目的:探讨HCY对高糖培养的HUVEC凋亡、细胞内活性氧的释放及凋亡基因Caspase3表达的影响,进一步探讨这种变化的机制。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,一定浓度HCY及高糖作用
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目的:探讨HCY对高糖培养的HUVEC凋亡、细胞内活性氧的释放及凋亡基因Caspase3表达的影响,进一步探讨这种变化的机制。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,一定浓度HCY及高糖作用细胞后,实验性模拟糖尿病的高同型半胱氨酸状态,随机分为四组:正常对照组、高糖组(HG组)、HCY组、HG+HCY组,分别在培养12h、24h、48h进行相关的实验和检测。采用倒置显微镜观察细胞生长状态,比色法检测培养细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)水平。碘化吡啶(PI)染色流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,RT-PCR测定Caspase3mRNA的表达。结果:5mmol/LHCY刺激后,HG组和HCY组呈时间依赖性凋亡,MDA含量明显升高,SOD活力明显降低,Caspase3mRNA表达逐渐增加(P＜0.01),且这种改变在HG+HCY组更明显(P＜0.01),并随时间延长有明显增加的趋势(P＜0.01)。结论:HCY可能通过氧化应激机制直接或间接(部分通过NF-KB途径)激活凋亡基因,使Caspase3mRNA表达增强,细胞发生凋亡性损伤,从而损伤血管内皮细胞,加重糖尿病血管病变的发生、发展。
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