猪链球菌能引起猪多种疾病,包括关节炎、脑膜炎和败血症等,在养猪业中能造成较大的经济损失。2型和9型是猪群中猪链球菌优势血清型之一,目前尚缺乏有效的疫苗预防猪链球菌病,对猪链球菌致病机理的研究是防控该病的基础之一。本实验室分离的9型猪链球菌DN13,在小鼠体内传了10代后,发现传代菌(SS9-P10)对小鼠的毒力显著增强。本实验室前期已对DN13进行全基因测定和对SS9-P10进行全基因组重测序。生物信息学分析显示,相较于亲本株DN13,含“EEPTTTTTT”重复序列和LPXTG基序的胶原结合蛋白Cbm,在SS9-P10中的非重复区域内发生了较多位点的突变。为研究9型猪链球菌中Cbm的作用,我们利用同源重组方法获得SS9-P10的cbm基因缺失菌株。实验结果发现cbm缺失菌株的生长速度及形态较SS9-P10没有发生明显变化,但是对小鼠的毒力降低。相较于亲本株SS9-P10,Cbm缺失后,小鼠死亡率减少了62.5%,而将cbm基因互补至缺失菌株后,细菌毒力又得到了恢复,但小鼠死亡率为75%,低于细菌缺失cbm前100%的死亡率,表明cbm是猪链球菌毒力相关基因之一,可能参与猪链球菌对宿主的致病。为进一步研究Cbm的致病作用,我们分别表达了不含EEPTTTTTT重复序列和含该重复序列的Cbm蛋白,纯化的两种Cbm蛋白添加氢氧化铝佐剂分别免疫小鼠3次后攻毒,结果显示免疫了无/有重复序列的蛋白的小鼠的死亡率(75%、100%)都显著高于对照组(25%),提示Cbm诱导产生的抗体增强了细菌感染,抗Cbm抗体可能有利于猪链球菌逃避宿主免疫机制。