对硫磷残留的酶联免疫检测技术的研究

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本研究通过制备对硫磷的特异性抗体,建立了蔬菜中对硫磷残留的酶联免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)。先将对硫磷苯环上的硝基还原为氨基,然后采用重氮化法将氨基-对硫磷与牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA)相偶联,分别合成了免疫原和包被抗原:氨基对硫磷-BSA、氨基对硫磷-OVA。对合成的抗原进行紫外可见扫描,确证偶联成功。用免疫原免疫新西兰大耳白兔,制得对硫磷抗血清,测得其效价为1:2000,用饱和硫酸铵沉淀法得到纯化抗体,与其它类似物的交叉反应为甲基对硫磷:1.22%,毒死蜱:0.09%,杀螟松:0.06%,标准曲线的线性范围为5-1000ng/mL。用此血清建立的ELISA方法检测蔬菜样品(小白菜、豆角、辣椒)中添加的对硫磷标准样品,平均回收率为96.52%,与GC方法的相关性很高,准确性大大高于酶抑制法,整个测定大约在(不包括包被时间)1.5h内完成。
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