论文部分内容阅读
目的:抗血小板治疗被广泛应用于具有血栓形成高风险的病人，并且已经成为冠状动脉疾病（coronaryarterydisease，CAD）治疗的基石。氯吡格雷作为抗血小板药物与阿司匹林联用可显著降低经皮冠状动脉介入术(percutaneouscoronaryintervention，PCI)后支架血栓的发生率。然而，由于个体差异、治疗依从性等因素的存在，部分病人在服用常规剂量的氯吡格雷之后，其血栓等心脏不良事件仍可发生，临床上将此种现象称为氯吡格雷抵抗(clopidogrelresistance，CR)。目前，引起氯吡格雷抵抗的机制尚未阐明，氯吡格雷是一种无活性的药物前体，必须在体内转化为有活性的代谢产物才能发挥抗血小板效应。氯吡格雷的这一体内转化过程提示个体对氯吡格雷反应的差异很有可能与遗传因素有关。氯吡格雷在体内的代谢主要通过细胞色素P4503A(CYP3A)系统完成。CYP3A由CYP3A4和CYP3A5同工酶组成。CYP3A4一直被认为是肝细胞的主要表现形式，CYP3A4活性受基因的表达水平调控，近年研究发现CYP3A5在部分人群的肝脏中也呈多态性。因此，CYP3A4和CYP3A5基因表达水平都可能是影响氯吡格雷对血小板抑制的重要因素，且两者可能具有协同作用。因此，本文拟采用焦磷酸测序和PCR限制性内切酶分析的方法，对CYP3A4和CYP3A5基因标签SNP进行基因分型，初步阐明CYP3A4和CYP3A5基因单核苷酸多态性与氯吡格雷抵抗发生的相关关系。
方法:本研究入选经冠状动脉造影证实的并接受双联抗血小板治疗（阿司匹林+氯吡格雷）的冠心病患者共800例。以光学比浊法测定20μmol/L浓度ADP诱导的残余血小板聚集率(Residualplateletagglutination，RPA)，定义RPA≥70％为CR，将患者分为CR组和氯吡格雷非抵抗组(Non-clopidogrelresistance，NCR)。所有入选病例提取血液白细胞基因组DNA后，分别采用聚合酶链反应，限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和焦磷酸测序的方法测定CYP3A4、CYP3A5基因标签位点单核苷酸多态性（TagSingleNucleotidePolymorphism，TagSNP）的基因型和等位基因分布情况。
结果:
1.本研究通过Hapmap数据库共入选CYP3A4基因标签SNP位点4个，CYP3A5基因标签SNP位点2个。
2.CYP3A4基因rs2242480、rs2246709、rs2404955及rs4646437单核苷酸多态位点与氯吡格雷抵抗的发生无明显相关关系(p＞0.05)。
3.CYP3A5基因单核苷酸多态位点rs3800959、rs11524与氯吡格雷抵抗的发生亦无相关关系(p＞0.05)。
结论:
CYP3A4、CYP3A5基因与氯吡格雷抵抗的发生无相关关系。